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实验方法

姜黄素通过下调microRNA-125b保护人视网膜色素上皮细胞免受高糖诱导的细胞损伤

2021年02月09日 浏览量: 评论(0) 来源:中国比较医学杂志2020年第12期 作者:苏军华 焦永伟 魏宏莲 责任编辑:yjcadmin
摘要:探究姜黄素对高糖诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞中microRNA-125b(miR-125b)表达及细胞损伤的影响。

目的    探究姜黄素对高糖诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞中microRNA-125b(miR-125b)表达及细胞损伤的影响。

方法    体外培养ARPE-19细胞,分为对照组、高糖组、高糖+姜黄素组、高糖+miR-125b 抑制物 (inhibitor)组、高糖+抑制物阴性对照(inhibitor-NC)组,MTT 检测 ARPE-19 细胞活性,Annexin V-FITC/PI双染法检测ARPE-19细胞凋亡情况,2′-7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针负载法检测细胞内活性氧(ROS)水平,酶 联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)水平,RT-qPCR 检测细胞中 miR-125b 表达水平。

结果     MTT 实验结果显示,姜黄素可显著提高高糖环境下ARPE-19细胞活性。 姜黄素可显著降低高糖环境下ARPE-19细胞凋亡率及ROS生成,增加SOD表达。 RT-qPCR实验结果显示,姜黄素可显著降低miR-125b表达水平。

结论    姜黄素可能通过下调miR-125b表达降低ROS生成及增加SOD表达,提高 ARPE-19 细胞抗氧化能力保护其免受高糖诱导的细胞损伤。


阅读原文:姜黄素通过下调microRNA-125b保护人视网膜色素上皮细胞免受高糖诱导的细胞损伤.pdf



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