目的 探讨磷酰胺氮芥（phosphoramide mustard，PM）诱导卵巢颗粒细胞损伤的机制及左归丸含药血清对受损颗粒细胞自噬与凋亡的影响。

方法 制备左归丸含药血清，体外培养原代大鼠卵巢颗粒细胞，待细胞生长至底壁的75%～80%时随机分为4组∶①对照组（Control）;②模型组（M）;③左归丸含药血清组（10%ZGW）;④模型+左归丸含药血清组（M+10%ZGW）、以 PM处理②④组 24 h 建立化疗源性颗粒细胞损伤模型后，①②组中加入 10%正常大鼠血清，③④组中加入 10%左归丸含药血清，37℃，5% CO₂，条件下培养24 h。流式细胞术检测各组颗粒细胞凋亡率，蛋白免疫印迹法（ Western blot）检测卵巢自噬启动因子 Beclin-1、微管结合蛋白轻链 3（LC3B）、自噬受体蛋白P62、凋亡蛋白 Bax、Caspase3 的表达。

结果 与对照组相比;模型组细胞凋亡率明显上升，Beclin-1、 LC3B、Bax及Caspase3 蛋白表达量增高，P62 蛋白表达量下降，差异均具有统计学意义（P<0.05）。10%左归丸含药血清可显著降低模型组颗粒细胞凋亡率，下调受损颗粒细胞中 Beclin-1、LC3B、Bax 及 Caspase3 蛋白的表达，上调受损颗粒细胞中P62蛋白的表达，差异均具有统计学意义（P<0.05）。

结论 PM 诱导了卵巢颗粒细胞损伤，促进了颗粒细胞凋亡，激活了颗粒细胞自噬/溶酶体降解途径;10%左归丸含药血清可降低化疗损伤性颗粒细胞凋亡率，与自噬相关蛋白的表达相关。

阅读原文：左归丸对磷酰胺氮芥体外诱导损伤颗粒细胞自噬与凋调亡的影响.pdf