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Marcksl1基因敲除初小步鼠分的析建立及造血表型

2021年07月13日 浏览量: 评论(0) 来源:中国比较医学杂志2021年第5期 作者:李博 高丽娟 于磊 张旭 李争光 刘宁 史旭东 高凯 李静 高珊 齐晓龙 张连峰 马元武 责任编辑:admin
摘要:建立Marcksl1基因敲除小鼠,初步探究该基因缺失对造血系统发育的影响。

目的 建立 Marcksl1 基因敲除小鼠,初步探究该基因缺失对造血系统发育的影响。 


方法 利用 CRISPR/ Cas9 技术构建 Marcksl1 基因敲除小鼠,通过 PCR 技术以及 Sanger 测序方法鉴定小鼠基因型。 通过将敲除 小鼠与野生型小鼠杂交,分析敲除小鼠的传代情况。 通过杂合子小鼠相互杂交,分析发育不同阶段纯合子、杂合子 和野生型小鼠的占比。 分离小鼠胎肝,利用血常规以及流式细胞术分析该基因缺失对造血系统的影响。 


结果 PCR 结合 Sanger 测序结果表明 Marcksl1 基因敲除小鼠构建成功。 对不同阶段胚胎小鼠基因型鉴定和数量统计,发 现小鼠 Marcksl1 基因敲除造成的胚胎死亡发生于胚胎发育后期。 通过血常规与流式细胞分析,结果表明 Marcksl1 基因缺失在 E15. 5 d 时不影响白细胞,红细胞以及血小板数量,但胎肝中造血干细胞比例显著增多。 


结论 本研究成功建立 Marcksl1 基因敲除小鼠,并发现该基因缺失影响造血干细胞占比。 本研究为进一步了解该基因在胚胎发 育和造血系统中的功能提供动物模型。


阅读原文:Marcksl1基因敲除初小步鼠分的析建立及造血表型.pdf


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