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细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)敲除和人源化小鼠模型的建立

2021年08月05日 浏览量: 评论(0) 来源:中国实验动物学报2021年第3期 作者:黄艺滢 张文龙 石桂英 雷雪裴 高苒 白琳 责任编辑:admin
摘要:建立细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)基因人源化小鼠模型,为靶向 CTLA4 的肿瘤 治疗性抗体研发和筛选提供有效的小鼠模型。

目的 建立细胞毒性 T 淋巴细胞相关抗原 4(CTLA4)基因人源化小鼠模型,为靶向 CTLA4 的肿瘤 治疗性抗体研发和筛选提供有效的小鼠模型。 


方法 利用CRISPR/ Cas9技术,建立CTLA4基因人源化和敲除小鼠模型,利用 PCR、RT-PCR、Western Blot、免疫组织化学和流式细胞术的方法对其进行鉴定及分析。 将小鼠黑色素 瘤细胞株(B16)注射到 CTLA4 人源化小鼠皮下,观察腹腔注射 CTLA4 单克隆抗体伊匹木( ipilimumab)的抗肿瘤效果。 


结果 CTLA4 人源化小鼠可以稳定表达人源 CTLA4,而不表达鼠源 CTLA4。 CTLA4 人源化小鼠出生后 6 个月 内正常存活,组织病理学及免疫系统未见明显异常。 同时在 CTLA4 人源化小鼠中,伊匹木减缓肿瘤生长速度。 CTLA4 基因敲除小鼠不表达 CTLA4 基因,在出生后 3 ~ 5 周内由于自身免疫疾病死亡。 


结论 同时建立了 CTLA4 人源化和敲除小鼠。 CTLA4 人源化小鼠可用于筛选与 CTLA4 基因相关的治疗性抗体或药物。 


阅读原文:细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)敲除和人源化小鼠模型的建立.pdf


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