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唯恐避之不及的细胞污染,我该拿你怎么办?
最近,赛业OriCell细胞交流群有很多同学在咨询细胞污染问题。提及细胞污染,还真是让每个培养细胞的新手老手唯恐避之不及呀。
害,细胞污染轻则实验结果出不来,重则祸及他人(实验室),前期投入的人力、物力、精力、财力和长期的坚守付诸东流。
常见的细胞污染类型
被细胞污染眷顾的科研emoer,看着一堆看不出来被什么污染的细胞,momo地流下了e滴眼泪......
细胞污染类型多样,我们盘点了常见的细胞污染类型,如下图:
细胞污染最直观的方式是观察形态,当培养体系出现细菌污染时,会出现培养基变浑浊,有异味,镜下观察有明显自由行动的颗粒或念珠状菌落。真菌通常倾向于聚集生长,在培养体系内形成“毛茸茸”的菌落,或丝状菌体,但一般不出现培养基变酸等现象。至于支原体污染,大部分没有任何异常情况,培养体系、细胞生长都正常,往往容易被实验员忽视,但若不及时处理,容易造成交叉污染,因此建议各实验室定期对细胞做支原体检查。
至于黑胶虫,目前关于它的本质还说法不一,根据《生物化学与生物物理进展》杂志(PIBB)2020年1期发表的《细胞培养中“黑胶虫”污染的检测及防治》文章,文中指出黑胶虫污染具有5个特征:①细胞状态差、②低倍下呈黑色点状、③高倍下做布朗运动、④培养基不浑浊、⑤与细胞数量成反比。为什么会出现黑胶虫?该怎么处理?这里留个悬念,后期再做深入介绍。
了解细胞污染的来源,可以帮助减少细胞污染发生的频率和后果的严重性。
OriCell专家的小建议
细胞培养的常规操作包括换液、传代、冻存和复苏,只要多多注意细节,提高自己的无菌意识和操作技术,掌握正确处理污染的方法,其实细胞污染是完全可以避免的,也没那么可怕。对此,OriCell专家整理了细胞污染的处理方法和预防攻略,希望大家能学以致用。
污染的处理
1. 做好与正常细胞的隔离。
2. 用大量含高浓度双抗的培养基、缓冲液冲洗。
3. 联用多种支原体清除剂。
4. 定时复检。
细胞污染后最好的处理方式是丢弃,除非是特别有价值的细胞值得“抢救”,可以试试用大浓度的双抗来杀死污染微生物。支原体污染后,可以选择支原体清除剂进行处理,但要注意的是,即使是最好的清除剂也只能清除几种或者某些类别的支原体,没有一种清除剂能够完全清除所有自然中浩如烟海的支原体。
污染的预防
1. 严格做好实验室环境管理。
2. 培养根深蒂固的无菌意识。
3. 降低对抗生素的依赖。
万事都具有两面性,抗生素也是一把双刃剑,一方面,使用抗生素能起到一定的预防污染作用,另一方面,它并不能保证百分百避免污染,而且要注意的是,使用不当可能会对细胞的生长状态有影响,甚至培养出“超级细菌”,切不可过分依赖。
应对不同细胞污染有不同的处理措施,要解决细胞污染最好的办法还是在源头上杜绝,与其亡羊补牢,不如防患于未然。另外,尽早留种冻存,以备后用。
“赛业云课堂:如何把细胞养的更漂亮”系列课程正在B站免费开播,欢迎各位新老童鞋多多关注我们,学习更多一手干货。其中关于细胞污染主题课程:《细胞污染,我们该如何应对》经典回顾,由赛业OriCell曹汐老师主讲,精彩内容如下:
别把其他不当重点。——重新理解污染
优秀总是枯燥,幺蛾子却各自精彩。——盘点常见的污染类型
别不承认,这事儿就你干的。——污染物的来源
掀起你的头盖骨!——污染物检测方法
磨人的小妖精,看打!——污染物的处理和预防
互动答疑
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