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体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验
2014年03月20日
来源：丁香园
作者：丁香园
责任编辑：test
摘要：体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验
| 实验方法原理 | 抗药性细胞模型的筛选大多采取长时间药物处理、诱导抗性，最总筛选出具有一定抗性的细胞克隆。 |
|---|---|
| 实验材料 |
小鼠
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| 试剂、试剂盒 |
小牛血清 DMEM DOX
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| 仪器、耗材 |
CO2培养箱 无菌钢圈
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| 实验步骤 |
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| 注意事项 |
1. 要具备培养细胞的实验室条件，谨防污染。
2. 通过实验计算出敏感细胞对该药物的IC50值，以确定其实诱导浓度。 3. 采用长期增量的培养法可产生稳定的抗药性细胞株，对阿霉素等产生抗性的细胞株，往往对其他天然来源的抗肿瘤药亦可产生抗药性。 |
实验心得：中药和西药的剂量设计有些差别，中药最高剂量一般为200 ug/ml，西药最高剂量一般为100 ug/ml，初筛药物分子量要求在200 g/mol 以上，即10 mmol。 另外，有些药物还原性很强，可以和MTT直接反应生成结晶紫，从而出现假阳性结果。 有些药物有颜色，可以在细胞内沉积，又能被最后的溶剂溶解，有些药物在490 nm 处有紫外吸收，如果有这种情况会出现越高剂量组OD值高出空白对照组，如果药物确实有作用，会出现U字形量效曲线。
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