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实验方法

贵州小型猪种质特性研究

2021年09月14日 浏览量: 评论(0) 来源:《中国实验用小型猪》 作者:冯书堂 主编 责任编辑:yjcadmin

(一)类属特性

贵州小型猪属哺乳纲、偶蹄目、不反刍亚目、猪科。臼齿属丘齿型,恒齿呈3.1.4.3/3.1.4.0,乳齿呈3.1.4.3/3.1.4.0,锯齿式系属Sus Scrofa系野猪驯化而成的家猪。1987年定名为贵州小型猪。

(二)颅型特性

成年小型猪颅指数=颅宽/颅长×100%,均值为55%(53%~57%),属长颅型。

(三)核型特性

取实验小型猪,自耳缘静脉采血,于36℃培养箱内放置56h,进行外周血淋巴细胞培养。在终止培养前4~5h加入秋水仙素,使多数细胞分裂停止于中期。培养结束后,姬姆萨染色、镜检,选取分散良好、形态清晰的中期分裂相进行显微拍照。

参照第一届国际家畜染色体显带核型标准会议所定标准,根据染色体着丝点位置核相对长度,将小型猪常染色体分为4个形态组,分别为:

Ⅰ组:1~5,近中着丝点染色体(sm.)。

Ⅱ组:6~7,近端着丝点染色体(t.)。

Ⅲ组:8~12,中着丝点染色体(m.)。

Ⅳ组:13~18,亚近端着丝点染色体(st.)。

以上各组内染色体按长度递减顺序排列。性染色体不分组,以X和Y表示。

小型猪体细胞染色体数2n=38,其中有18对常染色体,1对性染色体,雌性为XX,雄性为XY。X染色体(为中着丝点)与第9对常染色体形态相似,较难区分。Y染色体为近中着丝点染色体,长度最短。

(四)贵州小型猪全血的微量元素参数测定

实验小型猪很适合做人类许多疾病的动物模型。为了给医学提供研究方便,测定了贵州小型猪全血中Mg、Cu、Fe、Zn、Mn、Cr、Co、Cd、Ni、Pb、Se、I等12种元素的含量。

1.测定动物  取体重为30±2kg的健康成年贵州小型猪98只,雌雄兼有。

2.采血方法及血样的处理  方法同人血取样,采用湿法消化样品,用HNO3-HClO4灰化血样。测Se的血样另行处理。

3.测定方法  Fe、Cu、Zn、Mg、Co、Ni用火焰原子吸收法测定,其他用原子吸收分光光度法,偏振赛曼原子吸收分光光度计(日立180-80型)进行测定。

根据测定上述各元素的工作条件,在相同的条件下测定同一样品平行进样测得各元素的相对偏差较小。并在相同条件下采用标准加入法,即在分解样品前加入各元素的标准溶液进行回收率试验。计算出回收率平均在82.4%~103.3%。因此用该法测定血样中各元素的结果比较精密和准确。由于所测小型猪全血中12种元素都属于正态分布,因此计算了分析结果的均数及标准偏差,并制定出小型猪全血中Mg及11种微量元素的正常值范围。其测定结果见表2-1。

4.讨论

(1)根据文献报道,测定人体或动物微量元素含量大多数采用血清或血浆,采用全血的极少。但笔者认为用血清或血浆测定微量元素有不妥之处。例如,锌在红细胞内含量较高,用血清或血浆当样品来测锌的含量,就可能因溶血或血的凝固时一部分锌从血小板中释出,以及因加抗凝剂的污染,因而导致测试结果不准确,而采用全血测定则避免了血液各种成分间元素再分配的问题。因此我们认为对贵州小型猪的全血进行微量元素正常值的测定是比较理想的。

(2)本文报道的12种元素都属必需元素。对以贵州小型猪作为某些疾病的动物模型来研究疾病与这些元素的关系,以及疗效分析与元素的关系都有重要的意义。

(3)微量元素与其他的有机营养物质不同,它不能在人体内合成,而要从外界摄入,摄入过多或摄入不足均会影响到细胞和组织结构及功能,最终导致生理生化的改变而使有机体产生疾病。因此我们测定小型猪全血中的微量元素正常值,为临床研究人体微量元素营养状况,提供了一定的科学依据。


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