延续上篇

01 犬传染性呼吸系统疾病的诊断

在感染早期，所有犬类呼吸道病原体都能引起相似的临床症状，因此，仅凭临床症状是不能确认感染原因的。

从诊断测试中积累的证据表明，许多犬的呼吸道感染是病毒性的。一旦发生感染，对最常见的病原体进行鉴别诊断可能有助于设施管理者采取更恰当的措施应对疾病暴发。

在最早期，可能动物的症状较轻，或只有个别动物死亡，难以判断是单起孤立事件还是窝咳暴发的先兆，但不论是哪种情况，都应采集发病动物鼻拭子、口咽拭子和死亡动物的肺组织，并妥善保存以备分析。其中组织样本应分别采集制备福尔马林固定标本、冷藏标本和冷冻标本，以便进行组织病理学检查、病毒检测和细菌分离鉴定等工作。

当怀疑犬窝咳疫情时，应检测多只动物(至少5只，或受影响犬群的10-30%)，对于有临床症状的犬，应连续采集4天的结膜、鼻、咽拭子，以便在病原体脱落高峰期捕捉病原体。

多数病毒感染在出现临床症状后很快就会不再排毒，因此在诊断检测未能在有症状的动物中发现相关病原体的情况下，可以选择对有发病动物接触史但还没有生病的动物取样，这可能有助于找到合适的病毒检测窗口期。

兽医和动物管理人员必须知道，感染早期的检测结果往往比中后期的检测结果更有意义。

这是因为感染中后期往往会继发多种病原体的共同感染，但这些继发的感染并非导致疫情暴发的主要原因；而且，药物干预也会极大影响检测实验室的结果。因此在发生流行的早期、尚未用药时就应及时采样送检。

此外，任何在疾病流行期间死亡或安乐死的动物都应进行尸体解剖，并提交样本进行细菌分离鉴定，以及用PCR方法检测呼吸道病原体。根据具体情况，还可以进行其他测试，例如，可能需要进行药敏试验，以帮助选择更有效的抗生素。

拿到检测报告后，兽医也需要明白，仅仅一只犬样本中检测到某病原体的存在，并不意味着一定是该病原体导致了任何特定动物的疾病。而是应该在一群发病犬的样本中寻找有较高检出率的病原体作为怀疑目标，如果某种病原体在多只犬身上被发现，这就大大增加了致病关系存在的可能性。但即使是这样，也并不意味着能排除其他因素。

兽医也必须了解，大多数与CIRD相关的病原体甚至可以从临床上表现正常的犬身上检测出来。

一般来说，大多数不复杂的CIRD病例血检和影像学结果能提供的有效信息不多。然而，有肺炎证据的动物就需要仔细分析这些结果了。

02 关于检测实验室

发生疫情，检测实验室是必不可少的，对病原的鉴别诊断起到至关重要的作用，但是从样本采集到样本保存和运输，再到合适的检测方法的选择和实验室样本检测的过程，乃至最后的报告分析，每一步骤都可能导致报告中出现假阴性或者假阳性结果，或者误判报告中阳性或阴性结果的意义，不仅需要兽医准确判断采样时机、监督采样过程，也需要和检测实验室保持密切沟通，选择合适的检测方法、准确解读报告。

假阴性主要是由样品采集、处理或时机方面的问题引起的。例如，犬流感病毒只在病程的非常早期脱落，当出现临床症状时再采集样本，往往只能得到阴性结果；再比如RNA病毒稳定性差，在样品储存和运输过程中如果条件不当很容易降解，进而导致假阴性结果；如果需要进行细菌分离鉴定，则要求样本必须足够新鲜，而且如果不能立即实验，则需要用运输培养基转运样本，否则有些脆弱的细菌很容易在此过程中死亡，无法分离到。

假阳性主要和采集和运输过程中发生样品污染、实验室操作失误和近期的疫苗接种等因素相关。例如，改良活犬瘟热病毒疫苗在接种猴后三周仍然可以通过PCR方法检测到阳性结果；样本采集时发生交叉污染也是常见的；PCR检测的敏感性极高，有时会检测到某种病原体的弱阳性结果，但这种阳性结果的临床意义是未知的。

选择合适的检测方法也是非常重要的，例如，血清学检测是确认病毒感染的手段之一，但它不能区分是疫苗接种产生的抗体还是感染产生的抗体，而且IgG阳性不能区分是既往感染还是当下有感染，必须同时检测IgM才更有意义。

参考文献：

1. Chalker,  V. J . Mycoplasmas associated with canine infectious respiratory disease[J]. Microbiology, 2004, 150(10):3491-3497.

2. Margaret Gober,Robert McCloskey. Canine infectious respiratory disease management of outbreak situation. Zoetis Technical bulletin, 2017