目的 探究黄芪多糖(APS)调控沉默信息调节因子 1 / 叉头状转录因子 O1( Sirt1 / FoxO1)通路对多囊卵巢综合征( PCOS) 大鼠颗粒细胞自噬的影响。 

方法大鼠中分离卵巢颗粒细胞并经促卵泡刺激素受体 (FSHR)免疫荧光鉴定,且 CCK8 检测 APS 对卵巢颗粒细胞增殖的影响。 10-5 mol / L 丙酸睾丸酮、10 μmol / L C2-神经酰胺作用大鼠卵巢颗粒细胞 24 h 诱导 PCOS 大鼠颗粒细胞自噬模型,CCK8 检测细胞增殖情况;透射电镜观察自噬体情况;免疫印迹法检测细胞中 Sirt1、FoxO1、微管相关蛋白 1 轻链 3(LC3)蛋白表达情况。 

结果 免疫荧光检测显示,FSHR 蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的平均阳性表达量 93. 18% > 90%,可进行接下来实验。 0、100、200、400 μg / mL APS 处理正常卵巢颗粒细胞,在贴壁 0、24 h 比较,细胞 OD450差异均无统计学意义(P>0. 05)。 与正常组相比,模型组细胞核附近出现大量自噬小体,双层、单层膜包裹胞质形成封闭、圆形结构,部分自噬小体内膜溶解,自噬小体周围可见单层膜结构包裹着一些被降解的胞浆、类似自噬小体结构;100 μg / mL APS 组与模型组细胞结构类似,随着 APS 剂量的升高,自噬小体数量减少,在 400 μg / mL APS 组时细胞正常。 正常组、模型组、100、200、400 μg / mL APS 组在细胞贴壁 0 h 时,细胞 OD450差异无统计学意义(P>0. 05)。 细胞贴壁 24 h,与正常组相比,模型组细胞 OD450降低(P<0. 05),细胞中 Sirt1、FoxO1、LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ蛋白水平升高(P<0. 05);与模型组相比,100、200、400 μg / mL APS 组细胞 OD450升高(P<0. 05),细胞中 Sirt1、FoxO1、LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ蛋白水平降低(P<0. 05)。

 结论 APS可以抑制PCOS大鼠颗粒细胞自噬,可能是通过抑制自噬通路 Sirt1/FoxO1实现的。

阅读原文：黄芪多糖调控 Sirt1  FoxO1 通路抑制多囊卵巢综合征大鼠颗粒细胞自噬的研究.pdf