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模型制备

自身免疫动物模型

2021年11月26日 浏览量: 评论(0) 来源:《常见人类疾病动物模型的制备方法》 作者:秦川 责任编辑:yjcadmin

【操作步骤】取空肠弯曲菌琼脂基础培养基43g,加1000ml蒸馏水,煮沸溶解,经121℃、15min灭菌后,冷却至60℃左右,加入脱纤维蛋白羊血清50ml,抗菌增效剂和抗生素混合液10ml(含抗菌增效剂5ml、万古霉素10ml、多黏菌素B 2500U、两性霉素2ml和头孢菌素15ml),摇匀倾注于无菌平皿。将CJ-S131菌(中国疾病预防控制中心)密集接种于平皿,置二氧化碳培养箱培养48h。用含0.3%的甲醛生理盐水,洗下琼脂板上培养48h的CJ-S131菌苔,4000转/分,离心30min,弃上清液,用生理盐水将细菌悬液调整为浓度3×10的9次方CFU/ml。取细菌悬液与等量弗氏完全佐剂混匀,完全乳化后,取50μl给小鼠注射,免疫后第15d,给小鼠静脉注射相同浓度菌悬液0.2ml,加强免疫一次。致敏后4周,测血清抗体,体外抗体形成细胞(PFC)和淋巴细胞转化,同时取肝、肠、肾等组织,做病理学检查,用ELISA法测小鼠血清中抗ss- DNA和抗ds-DNA自身抗体。

【结果分析】免疫小鼠1个月,小鼠血清中抗ss-DNA和抗 ds-DNA抗体水平明显增高;脾细胞以PFC值明显增高;在刀豆蛋白A刺激或无有丝分裂原作用条件下,淋巴细胞的转化率明显增强;在肝脏有散在的炎性细胞浸润灶,浸润细胞以中性粒细胞和淋巴细胞为主,枯否细胞明显增生;在肾脏,肾小球系膜细胞明显增生,肾小管上皮细胞有浊肿样变性;在肠道可见大量的炎性细胞浸润,肠上皮细胞有明显增生。该模型对研究自身免疫反应的发病机制有重要意义。


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