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模型制备

溶组织内阿米巴原虫感染动物模型

2021年12月01日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 作者:周光兴 责任编辑:yjcadmin

阿米巴自然界中分布很广,多数营自生生活。寄生种类都归属于内阿米巴科,大多数寄生在宿主的消化道内。寄生人体的阿米巴不到十种。现仅发现溶组织内阿米巴对人体有侵袭组织的致病能力(如肠壁、肝脏、肺及其他部位的溃疡、脓肿和肉芽肿等),其他均为腔道寄生,正常情况下不致病,个别种类阿米巴在重度感染或特殊情况下可引起腹泻。某些自生生活的阿米巴,可通过接触引起眼部感染及脑膜脑炎。国内邓新国等在家兔角膜基质层内注入培养的纯棘阿米巴原虫悬液,制成了棘阿米巴角膜炎动物模型;孙加任等对仓鼠进行肝脏接种阿米巴滋养体后所出现的病理学进行了研究;余涌等应用肝内接种法建立了实验性肝阿米巴病金黄仓鼠模型,并观察了肝阿米巴病的病理形态。国外Gill NJ、Das SR等利用胆固醇或孕酮处理动物,建立了肠阿米巴模型,此模型使其发生肠病变,但不伴发肝脏损害;Beg MA等制成了叙利亚金黄仓鼠颊袋溶组织内阿米巴脓肿的实验模型;Variyam EP等制成了非侵袭性溶组织内阿米巴感染的动物模型;Bhatti HS等制成了豚鼠溶组织内阿米巴瘤实验模型;Bhol KC等制成了随机繁殖小鼠的肝阿米巴病动物模型;Owen DG利用2株溶组织内阿米巴感染多个品系小鼠进行造模动物的比较;Jervis HR等用溶组织内阿米巴感染无菌豚鼠制作阿米巴痢疾的动物模型;Chiari L等以仓鼠作为生物学模型进行肌肉阿米巴病实验。

(1)复制方法  ①溶组织内阿米巴悬液制备:将培养48h时阿米巴培养管冰浴5min,收集培养物,用260目尼龙绢过滤。离心1500r/min,5min,取沉淀物上层,再离心清洗,取沉淀制备悬液,在显微镜下调节滋养体浓度至5×1000000/ml。中性红染色,显微镜下观察鉴定滋养体活力。②仓鼠肝内接种滋养体:按0.4ml/100g体重的剂量经腹膜注射1.5%戊巴比妥钠麻醉仓鼠。无菌操作下作左上腹旁正中切口,以5号针头将阿米巴悬液0.1ml注入肝右叶实质内,腹腔滴加庆大霉素,用医用黏结剂封闭腹腔切口。

(2)模型特点  接种后6d病变以肝细胞变质为主,细胞浸润轻,肝细胞变性坏死是因溶组织内阿米巴直接破坏宿主细胞引起。接种后12d病变除变质性病变外,还表现为细胞浸润和细胞增生明显,伴肝细胞变性坏死,其原因主要是除阿米巴作用外,浸润的炎症细胞在破坏宿主细胞和病变扩大中发生作用所致。此造模动物病理组织学改变相似于人肝阿米巴病。

(3)比较医学  不同的阿米巴其寄生部位不同,致病性也不同。不同的实验动物和不同的接种部位可复制出不同的动物模型。猫一般无溶组织内阿米巴自然感染,人工接种后死亡率高;幼犬虽对阿米巴敏感,但个体差异大;各种鼠类较为理想。不同的研究目的可选择不同的模型动物。本方法复制的模型可用于研究肝阿米巴病的发展规律及发病机制。


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