对阳性结果进行确认和分析

☑ 即使最好的检测方法，也有可能出现假阳性的结果，这是方法本身或人员操作的问题。例如ELISA法就比较容易出现假阳性； 

☑ 之前的文章有提到，不同检测机构的检测结果可能是不一样的； 

☑ 所以一定要验证阳性结果。 

☑ 直接沟通：如果可以的话，一定要和检测人员对阳性结果进行讨论。如果是国内的检测机构，可以直接沟通。国外机构需要发邮件，而且有时差，沟通会比较耗时； 

☑ 对方的验证方法：很多检测机构，在告诉你阳性结果的时候，其实已经验证过了。所以你要跟对方确认，是用什么方法，怎么去验证的； 

☑ 最好使用另一种方法验证：比如ELISA检测阳性，然后使用IFA法对同一样本进行验证。只有两种检测方法验证的检测结果是一致，检测结果的可信度才会高一些。如果对方是用同一种方法，操作了两次，你一定是要打问号的； 

☑ 推荐送不同的检测机构去验证：这也是之前提到的，你要熟悉你的友军。 

确认感染范围

经过确认真的感染了病原体之后，我们要理性地接受事实并进行分析。 

【养兵千日】

☑ 平时就要把相关病原体的所有的资料都收集到一起。这个需要平时有意识地搜集资料并进行整理，一定避免临时抱佛脚； 

☑ 在资料整理时，要有意识的排序。权威的、经典的资料排在前面，并一定要注明资料来源； 

☑ 如果是英文资料，最好要整理成中英文对照，中文方便自己和他人理解，英文方便确认翻译的准确性。 

【用兵冷静】

☑ 把手头所有的资料都看一遍； 

☑ 先看权威性高且比较新的资料，再看比较旧的资料； 

☑ 要并梳理出所有可能的漏洞，都重新推敲一遍。 

【穷尽所有可能性】

☑ 有些病原体通过粪口途径传播，有些通过人员操作不严格传播，有些通过气溶胶传播，有些通过污染环境而传播，还有一些病原体是混合传播的； 

☑ 所以，在分析的时候，要列出所有可能性，然后逐一排查。 

【推测，然后去验证】

☑ 传染性非常强的病原体，例如小鼠诺如病毒、小鼠肝炎病毒、体外寄生虫等。需要考虑整个设施感染的风险； 

☑ 某些传染性比较差的病原体，比如说螺旋杆菌，在管理严格的设施，可能只局限于某个笼架的几个鼠笼； 

☑ 在推测出病原体的传播范围之后，要对不同的区域，设计不同的采样比例去采样送检。因为推测毕竟只是推测，需要去验证。 

【结果，再评估】

☑ 通过检测结果，再次评估病原体在设施内的感染范围。我们只有在拿到检测结果之后，才能确认感染范围，一定要用数据说话； 

☑ 然后把设施分为三个区域：

低风险区——目前没有检测到阳性，需要持续关注的；

中风险区——目前没有检测到阳性，但是有感染的风险，需要加强检测，持续关注；

高风险区——已经检测到阳性，需要进一步评估处理方案的。

可以参考新冠病毒的低风险区、中风险区、高风险区。 

查找感染来源

有时很难，但是一定要尽力去思考去分析，对所有的环节进行梳理。可以采用思维导图辅助梳理。 

我们还要对所有的阳性样本进行分析，分析这些阳性样本之间有没有规律，这些阳性样本是在一个饲养室，同一个操作人员，同一个笼架，还是说压根没有任何关系，完全随机的。这种阳性样本之间的关系，对分析样本的感染来源也是非常关键的。 

从动物的来源、接触的物料、物品进入方式、人员操作、消毒效果等等都要逐一排查。在这些关键因素都排查过之后，如果还没有找到原因，你可以扩大排查范围，可以去查仓库、供应商、检测机构等等。所有你能想到的因素都要去查，直到找到感染来源。 

举个例子，几年前，赛业的动物样本，送国外机构进行COA检测，PCR方法检测到了乙型溶血链球菌。后来我们追查，这个菌来源于饲料中的鱼粉。因为是辐照饲料，而且饲料无菌检测是阴性的，所以这个菌是饲料中的死菌残留，会随着粪便排出体外，对动物没有影响。这就提醒我们，当检测到阳性结果的时候，不一定是动物本身的问题。 

对阳性病原体不同的策略

根据病原体对设施、对动物、对实验的影响，制定处理方案，没有统一的标准。 

你知道这个病原体的存在，经过评估对动物的影响有限，没有必要清除或者清除的代价太大，可以放弃。例如之前推文提到的奇异变形杆菌。 

进行大规模的筛查，然后剔除检测到的所有阳性动物。这点需要对这个病原体有自检能力。否则送外部检测，这个检测费用是非常昂贵的。还要求有能力将病原体控制在一定范围之内，否则人员操作如果不规范，以人员为媒介传播病原体，分分钟让你的心血付诸东流。 

经过评估，病原体对种群影响有限，对动物使用的影响有限，考虑到种种原因，可以不立即淘汰种群。然后制定淘汰计划，逐步淘汰就行。 

经过评估，病原体对种群影响很大，传染性很强，或者对设施内的其他动物种群有影响，那我们就需要考虑立即淘汰，重新建群。例如小鼠肝炎病毒对于生产设施，就必须尽快淘汰，重新建群。 

清除病原体的方式 

即胚胎移植，是目前最可靠的净化方式。理论上有个别病原体不能通过IVF净化的方式清除。例如：淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒，POLY（多瘤病毒）和肾细小病毒（MKPV）。但是前两种病毒出现的比例极低，肾细小病毒是新发现的，目前国内机构关注的比较少。可以考虑使用脏垫料哨兵鼠方法进行监测。 

是一种比较经典的净化方式。有资料表明能够有效的清除小鼠细小病毒、幽门螺杆菌和MNV。但是它的可靠性比起IVF的要稍微差一点。所以为了保证净化效果，可以考虑两轮剖宫产净化。 

也称为代乳。有资料表明代乳能有效清除多种常见的小鼠病原体，包括MPV、MHV、MNV和幽门螺杆菌。与剖腹产相比，它的优势在于成本更低，而且不需要对有价值的母鼠实施安乐死。 

有资料表明，这种方式能够有效清除幽门螺杆菌、细小病毒、MHV、MNV和小鼠轮状病毒。但这种方式对检测能力、设施管理能力、人员操作要求比较高。 

药物治疗效果不可靠，而且只适用于个别的病原体，有资料提到IVC饲养的挠虫和螨虫的治疗。可以考虑用于特别珍贵的稀有品系，不适合用于治疗大规模种群动物。 

如果一个种群发现了病毒感染，在停止繁育和新引进动物的基础上，让该病毒在现有免疫健全动物中充分传播、感染所有动物并通过动物的免疫系统清除病毒，使病毒在现有动物群体中“燃尽“（Burn out），这一过程约需要15周。历史上曾成功过，但目前不建议使用。因为这种成功，在我们现在这种设施以及现在饲养的动物种群中，已经很难复制了。