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模型制备

蒿花粉和蛋清蛋白诱导变态反应性鼻炎

2021年12月30日 浏览量: 评论(0) 来源:《常见人类疾病动物模型的制备方法》 作者:秦川 责任编辑:yjcadmin

【操作步骤】选用无鼻炎或鼻前庭炎的健康成年家兔,1.5~2.0kg。实验前配制花粉变应原,用昆明地区蒿属花粉55g,脱脂使脂肪含量低于3%,按1:20的比例加入Coca's液(含0.5%的氯化钠、0.375%碳酸氢钠、0.4%酚等),过滤、透析、浓缩、灭菌后,测定总氮含量为1.25mg/ml。用75%的乙醇消毒鸡蛋壳后,抽取蛋清,作为蛋清蛋白变应原:将两种变应原分别与等量弗氏完全佐剂混合,分别免疫家兔。第1次免疫,于兔后掌、背部4点皮下,各注射0.5ml,共3.0ml。1周后第2次注射相同变应原,于兔后腿内侧肌肉和背部4点皮下,各注射0.5ml,共3.0ml。每隔一周在相同部位按上法再免疫一次,共3次。蒿花粉组和蛋清蛋白组分别应用蛋清蛋白和浓缩蒿花粉变应原滴鼻,每天1次,每次每侧鼻腔6滴,共2周。第4次注射后1周,第2组动物耳静脉注射浓缩变应原2.5ml,并在1周后重复注射1次。第1组动物在第4次注射后,第2组动物在第6或7次注射后,用絮状沉淀法测定血中抗体效价,达1:400以上者作为实验动物。合格动物用相应的变应原滴鼻,每次每侧鼻腔10滴,每天滴鼻1次,共5d。

【结果分析】鼻腔内第5次滴入致敏变应原后,第1、2组动物均发生类似喷嚏的反应。10min后,用放大电耳镜插入前鼻孔观察,见下鼻甲和鼻中隔稍充血肿胀。0.5h时充血肿胀明显,总鼻道内充满分泌物,前鼻孔下方皮毛全部浸湿。部分动物有白色和无色的鼻涕溢出,但鼻拭纸涂片未查见嗜酸性粒细胞。少数动物在短时间内有烦躁不安、搔抓鼻部和尖叫等表现,持续1~2min。不同时间处死动物,取材时见10min、30min、3h的动物整个鼻甲充血肿胀明显,24h以后逐渐趋向正常。第1、2组动物鼻黏膜组织学改变基本相同。光镜所见:变应原激发后10min至3h鼻黏膜明显水肿,血管扩张,固有层中细胞浸润以中性粒细胞多见,激发后30min,血管周围有少量嗜酸性粒细胞,部分区域上皮细胞和绒毛脱落。变应原激发后24h,水肿较前减轻,固有层中浸润细胞增多,有淋巴细胞、中性粒细胞和少量浆细胞,部分区域淋巴细胞增多。激发后10d,细胞浸润以淋巴细胞为主,浆细胞数量增多,20d时浆细胞数量更多。


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