目的 探讨芦荟大黄素(AE)调控子宫内膜癌细胞 HEC-1-B 中 miR-30b 表达促进细胞自噬的作用机制。 

方法 实时荧光定量聚合酶链式反应( qRT-PCR)检测 miR-30b 在正常子宫内膜细胞和不同子宫内膜癌细胞株 HEC-1-A、HEC-1-B、RL95-2 中的表达水平。 取 miR-30b 表达水平最高的 HEC-1-B 癌细胞分为 HEC-1-B 癌细胞组、miR-30b inhibitor NC 组(转染 miR-30b inhibitor NC)、miR-30b inhibitor 组(转染 miR-30b inhibitor)以及 AE 组 (30 μmol / L AE,未转染)和 AE+转染组:AE+miR-30b mimics NC 组(30 μmol / L AE,转染 miR-30b mimics NC)、AE+ miR-30b mimics 组(30 μmol / L AE,转染 miR-30b mimics)。 qRT-PCR 法检测各组细胞 miR-30b 表达水平;CCK-8 法检测各组细胞增殖活性;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色法检测各组细胞自噬率; 蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测各组细胞自噬相关蛋白 Beclin1、LC3-I、LC3-II 和 p62 表达水平。 

结果 与人 正常子宫内膜上皮细胞相比,HEC-1-A、HEC-1-B 和 RL95-2 癌细胞中 miR-30b 表达水平显著升高(P < 0. 05)。 其 中 HEC-1-B 癌细胞中 miR-30b 表达水平最高,所以后续将选择 HEC-1-B 癌细胞进行转染实验。 与 HEC-1-B 癌细胞组和 miR-30b inhibitor NC 组相比,miR-30b inhibitor 组癌细胞 miR-30b 表达水平、细胞增殖率以及 p62 蛋白表达水平显著降低(P < 0. 05),细胞凋亡率、自噬率以及 Beclin1 蛋白表达水平和 LC3-II/ I 比值显著升高(P < 0. 05)。 与 HEC-1-B 癌细胞组相比,AE 组和 AE+miR-30b mimics NC 组癌细胞 miR-30b 表达水平、细胞增殖率以及 p62 蛋白表达水平显著降低(P < 0. 05),细胞凋亡率、自噬率以及 Beclin1 蛋白表达水平和 LC3-II/ I 比值显著升高(P < 0. 05)。 与 AE+miR-30b mimics NC 组相比,AE+miR-30b mimics 组癌细胞 miR-30b 表达水平、细胞增殖率以及 p62 蛋白表达水平显著升高(P < 0. 05),细胞凋亡率、自噬率以及 Beclin1 蛋白表达水平和 LC3-II/ I 比值显著降低(P < 0. 05)。 

结论 子宫内膜癌细胞中miR-30b表达较高,AE可能通过抑制miR-30b表达,促进癌细胞自噬和凋亡,抑制癌细胞增殖,而过表达miR-30b可逆转AE发挥的作用。 

阅读原文：芦荟大黄素调控miR-30b促进子宫内膜癌细胞自噬的研究.pdf