衰老大鼠心肌梗死模型
1.造模材料 动物:Wistar雄性大鼠,体重180~220g;药物:乌拉坦,D-半乳糖,青霉素。
2.造模方法 实验大鼠适应性喂养1周后(或3天后),腹部皮下注射D-半乳糖(D-gal)500mg/(kg·d),连续6周,制造大鼠衰老模型。在此基础上制作衰老心肌梗死模型:用20%氨基甲酸乙酯0.6g/kg腹腔注射麻醉大鼠,仰卧固定,切开左胸部皮肤,于第4肋间隙钝性分离肌肉,轻压右胸,挤出心脏,于肺动脉圆锥与左心耳间、距左冠状动脉起源2~3mm处,用带0号丝线的弯针结扎冠状动脉,通过观察左室表面局部发绀和心电图ST段抬高来证实模型成功;随后将心脏送回胸腔,排出胸腔内空气,缝合切口。术后每天肌内注射青霉素80万U,预防感染3天。
3.造模原理 运用D-半乳糖与冠状动脉结扎制造衰老大鼠心肌梗死复合模型。
4.造模后的变化 正常大鼠毛发黄色有光泽,整齐,活泼好动,正常饮食。连续6周的D-半乳糖皮下注射后,大鼠毛发枯糙,欠光泽,并有脱落,且活动量较正常大鼠明显减少,喜蜷伏于一角。在抓取动物时,挣扎也不如正常大鼠剧烈。
造模后第4天观察正常组、模型组大鼠的饮食量,连续7天。结果显示,模型大鼠饮食量均明显减少,说明D-半乳糖皮下注射后已经造成一定的损伤,符合衰老大鼠的基本特点。模型组大鼠的自发性活动明显减少。
5.造模后病理及生化变化 正常组心肌纤维纹理清晰连续,无断裂肿胀坏死;模型组梗死灶内心肌纤维变性坏死,坏死心肌纤维肿胀断裂、均质化,纵纹及横纹消失,梗死区见有出血,少量吞噬细胞浸润。
外周血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和心肌组织脂褐素含量的测定:模型组大鼠GSH-Px活性较正常组明显降低[正常组(652.97±133.92)μmol/L,模型组(185.23±61.32)μmol/L],说明造模后动物促进过氧化氢分解的能力降低,同时心肌组织中过氧化物脂褐索含量却比正常组增多[正常组(1.006±0.168)μg/g,模型组(1.594±0.187)μg/g]。
6.注意事项 手术器械严格消毒,防止手术感染,手术创伤应尽可能小,严格无菌操作。