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去氢木香内酯诱导胃癌细胞自噬和凋亡及氧化应激
目的 探索去氢木香内酯(DHCL)对胃癌细胞 SGC-7901 自噬、凋亡及氧化应激的影响。
方法 将体外培养 SGC-7901 细胞分为 DHCL 0 μmol / L 组、DHCL 10 μmol / L 组、DHCL 20 μmol / L 组和 DHCL 40 μmol / L 组。 CCK-8 法检测各组细胞增殖,免疫荧光检测细胞自噬活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,ELISA 法检测细胞上清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,DCFH-DA 探针检测细胞内活性氧自由基(ROS)水平;Western blot 检测 LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin 1、自噬相关蛋白 7(ATG7)、p62、B 细胞淋巴瘤 2(Bcl-2)、 Bcl-2 相关 X 蛋白( Bax)、BH3 相互作用域死亡激动剂( Bid)、截短型 Bid ( tBid)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 8 (Caspase-8)、Caspase-9、Caspase-3、裂解的 Caspase-8(cleaved Caspase-8)、cleaved Caspase-9 和 cleaved Caspase-3 蛋白表达。 皮下种植 0. 2 mL SGC-7901 细胞悬液(1×107 / mL),经 DHCL(腹腔注射 20 mg / (kg·d),2 周)干预后,进行移植瘤组织称重。
结果 DHCL 40 μmol / L 组和 DHCL 20 μmol / L 组细胞存活率低于 DHCL 0 μmol / L 组( P< 0. 05),细胞自噬活性和细胞凋亡率高于 DHCL 0 μmol / L 组(P< 0. 05),细胞 SOD 和 GSH-Px 水平低于 DHCL 0 μmol / L 组(P<0. 05),MDA 和 ROS 水平高于 DHCL 0 μmol / L 组(P<0. 05),细胞 p62 蛋白表达低于 DHCL 0 μmol / L 组,Beclin1、LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ、ATG7、Bax / Bcl-2、tBid / Bid、cleaved Caspase-8/ Caspase-8、cleaved Caspase-9/ Caspase-9 和 cleaved Caspase-3/ Caspase-3 蛋白表达高于 DHCL 0 μmol / L 组(P<0. 05);裸鼠移植瘤结果显示,DHCL 组裸鼠移植瘤质量低于对照组(P<0. 05)。
结论 DHCL 可以促进 SGC-7901 细胞内 ROS 产生,诱导细胞自噬性死亡和凋亡。
阅读原文:去氢木香内酯诱导胃癌细胞自噬和凋亡及氧化应激.pdf
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