目的 探讨肝细胞中的模式识别受体 NOD2(nucleotide-binding oligomerization domain 2,NOD2)在肝炎症反应过程中的作用及机制。 

方法 以二乙基亚硝胺( diethylnitrosamine,DEN)注射的 NOD2 基因敲除小鼠为 Nod2^△hep模型组,DEN 注射的 B6 / JNju-Nod2^em1Cflox / Gpt(Nod2^{f/ f})小鼠为 Nod2^{f/ f}模型组,未注射 DEN 的 NOD2 基因敲除小鼠为 Nod2^△hep组,未注射 DEN 的 Nod2^{f/ f}小鼠为 Nod2^{f/ f}组。 使用 HE 染色检测肝病理损伤,使用 ALT 和 AST 试剂盒检测血清中 ALT 和 AST 水平变化;对小鼠的肝组织进行 F4 / 80 免疫组化染色检测肝炎细胞的数量以及 qPCR 法检测肝细胞炎症因子的基因表达水平及肝细胞 NOD2 的表达水平;Ki67 免疫组化染色和 TUNEL 染色检测 DEN 对肝细胞增殖及凋亡的影响;Western Blot 检测肝组织中 NF-κB、MAPK 和 STAT3 信号通路相关蛋白分子的表达。 

结果 与 Nod2^{f/ f}模型组相比,Nod2^△hep模型组小鼠肝损伤情况明显减轻,表现为细胞坏死及空泡形成明显减少,血清 ALT 和 AST 水平均明显下降(P< 0. 01);另外与 Nod2^{f/ f}模型组相比,Nod2^△hep模型组中肝组织炎症因子 TNF-α、 IL-6、IFN-γ 和 IL-1β 的基因表达水平、肝组织 F4 / 80 染色阳性细胞数及肝细胞的增殖及凋亡水平均明显下降(P< 0. 01);Western Blot 表达结果表明,Nod2^△hep模型组小鼠肝组织中的 P38、ERK、JNK、p65 以及 JAK2 / STAT3 蛋白磷酸化水平较 Nod2^{f/ f}模型组明显下降(P< 0. 05),而用于对照的 Nod2^△hep组小鼠与 Nod2^{f/ f}组小鼠上述各项指标均无明显异常。 

结论 肝NOD2缺失有减轻小鼠肝细胞炎症及坏死的作用,其机制可能与其下调肝组织 NF-κB、MAPK 和 STAT3 信号通路相关因子的表达有关。

阅读原文：NOD2促进二乙基亚机硝制胺研诱究导小鼠肝组织炎症的机制研究.pdf