目的 基于微小RNA(miR)-223/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)轴探讨柚皮素 (NAR)对氧诱导视网膜病变(OIR)中小胶质细胞活化的影响。 

方法 150只7日龄(P7)C57BL/6J幼鼠分为常氧组、OIR 组、NAR 组、NAR+阴性对照组、NAR+miR-223 拮抗剂组,每组 30 只。 除常氧组外,其余各组幼鼠及其母鼠在 P7~ P12 移至氧气体积分数(75±2)%封闭氧箱中,连续 5 d,P12 返回正常氧环境中;常氧组在正常氧环境中常规饲养。 NAR 组幼鼠腹腔注射 100 mg / (kg·d) NAR,NAR+阴性对照组在 NAR 基础上 P12 尾静脉注射 2. 5 mg / kg miR-223 拮抗剂阴性对照,NAR+miR-223 拮抗剂组在 NAR 基础上 P12 尾静脉注射 2. 5 mg / kg miR-223 拮抗剂,常氧组、OIR 组每天腹腔注射等体积 CMC、P12 尾静脉注射等体积生理盐水。 实时荧光定量 PCR(RT-qRCR)检测视网膜中 miR-223 水平;幼鼠眼底行荧光素眼底血管造影(FFA);苏木精-伊红(HE)染色观察视网膜形态;免疫荧光检测视网膜中小胶质细胞标志物钙离子结合蛋白-1(Iba-1)情况;Western blot 检测视网膜中 NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白 酶-1(Caspase-1)、白细胞介素(IL)-1β 及 IL-18 蛋白表达情况。 

结果 OIR 组出现血管破裂,荧光漏在视网膜中,视网膜泛白,血管出现收缩,视网膜厚度变厚、细胞排列松散,部分出现细胞缺失现象、血管新生现象;NAR 组、NAR+阴性对照组血管破裂现象缓解,视网膜泛白现象减轻,但视网膜细胞仍松散;NAR+miR-223 拮抗剂组血管破裂,荧光漏在视网膜中,视网膜泛白明显,视网膜细胞松散严重、细胞缺失明显。 与常氧组相比,OIR 组视网膜中 miR-223 水平降低 (P<0. 05),视网膜中 Iba-1 水平、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18 蛋白水平升高(P<0. 05);与 OIR 组相比,NAR 组、 NAR+阴性对照组视网膜中 miR-223 水平升高(P<0. 05),视网膜中 Iba-1 水平、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18 蛋白水平降低(P<0. 05);分别与 NAR 组、NAR+阴性对照组相比,NAR+miR-223 拮抗剂组视网膜中 miR-223 水平降低(P< 0. 05),视网膜中 Iba-1 水平、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18 蛋白水平升高(P<0. 05)。 

结论 NAR 能够升高miR-223的表达进而抑制NLRP3炎症体的表达,从而缓解小胶质细胞过度活化现象,实现对OIR的缓解。 

阅读原文：基于miR-223NLRP3轴研究柚皮素对氧诱导视网膜病变中小胶质细胞活化的影响.pdf