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模型制备

伤寒杆菌内毒素诱发的大鼠葡萄膜炎模型

2022年06月09日 浏览量: 评论(0) 来源:《眼科实验动物学》 作者:魏世辉、王志军 主编 责任编辑:yjcadmin

1.模型制作方法  SD大鼠,二级,6~8周龄,体重150~180g,雄性。所用内毒素为伤寒杆菌内毒素(LPS,Sigma)。将内毒素溶于无菌生理盐水中,使溶液浓度为2g/L,将50μl内毒素分别注射于实验组大鼠的双后足底部,每只鼠的注射总量为100μg;于注射前及注射后第4、6、12、18、24小时进行裂隙灯及眼底镜检查,必要时用托品酰胺散瞳检查,详细记录临床体征的改变。参照并修改Hoekzema等的方法对临床表现进行评价与计分:虹膜充血、前房内渗出、前房积脓、瞳孔缩小各0~2分,总分为8分。正常对照组双后足底部仅注射50μl生理盐水。

2.观察指标与分析

(1)房水蛋白含量测定:于内毒素注射后24h处死前,将等量氯胺酮与氯丙嗪(各1ml/kg)混合后于鼠腹腔注射全身麻醉,丁卡因滴眼剂局部麻醉。在解剖显微镜下,用29号针头通过透明角膜进行前房穿刺,将每只鼠双眼的房水分别收集,储存于一20℃冰箱内,采用考马斯亮蓝G2250染料法作房水蛋白定量。结果表明,正常组房水蛋白的质量浓度最高值为4.2g/L,最低值0.5g/L,平均值(2.3±1.8)g/L;实验组内毒素注射后24h房水蛋白的质量浓度最高值为24.4g/L,最低值18.3g/L,平均值(21.3±3.0)g/L,二者有显著差异(P<0.001)。

(2)眼病理学检查:虹膜血管扩张,虹膜睫状体、前后房及玻璃体腔均有炎症细胞浸润,以多形核中性粒细胞为主,有一定量的淋巴细胞、单核巨噬细胞。角膜背部大量中性粒细胞黏附,虹膜睫状体基质增厚,上皮细胞破坏,失去正常结构,瞳孔闭锁;视网膜显著增厚,大量多形核白细胞浸润,累及视盘,一些部位可见视网膜下浆液性渗出,脉络膜轻度受累,表现为脉络膜水肿及炎症细胞浸润。


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