目的 探究β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白 B-1(Apbb1)基因对 H9c2 心肌细胞增殖的影响。 

方法 利用小干扰RNA 与 pcDNA3. 1+质粒对 H9c2 心肌细胞系进行敲低与过表达 Apbb1 基因处理,通过 CCK8 实验、 qPCR 实验以及细胞免疫荧光实验检测细胞增殖情况,评价 Apbb1 基因对心肌细胞增殖的作用;利用在线数据库 String 分析 APBB1 蛋白的互作蛋白,探究其可能发挥作用的方式。 实验分为 4 组:敲低对照组、敲低 Apbb1 组、过表达对照组和过表达 Apbb1 组。 

结果 相较于敲低对照组,敲低 Apbb1 组 Apbb1 基因表达下降 52%(P<0. 01,n = 3) ,细胞增殖在 48 h 时下降 44%(P<0. 01,n = 3) ,但是在 72 h 时细胞增殖增加 86%(P<0. 0001,n = 3) ;细胞周期相关基因 Ccnb1 和 Ccna2 mRNA 表达水平分别升高 80%(P<0. 0001,n = 3)和 76%(P<0. 0001,n = 3) ;细胞免疫荧光实验发现 PH3 与 Aurora B 阳性细胞分别增加 4. 33%(P<0. 01,n = 3)和 4. 67%(P<0. 05,n = 3) 。 相较于过表达对照组,过表达 Apbb1 组 Apbb1 基因表达上调 119 倍(P<0. 001,n = 3) ,细胞增殖在 48 h 与 72 h 分别降低 1. 23 倍(P<0. 0001,n = 3)和 1. 04 倍(P<0. 0001,n = 3) ;细胞增殖标志分子 Ki67 和细胞周期相关基因 Ccnb1 和 Ccna2 mRNA 表达水平分别降低 25%(P< 0. 01,n = 3) 、72% ( P< 0. 001,n = 3) 和 38% ( P< 0. 001,n = 3) ;PH3 与 Aurora B 阳性细胞分别降低 3. 7% ( P< 0. 01,n = 3) 和 4. 36% ( P< 0. 05,n = 3) 。 蛋白互作网络分析结果表明 KAT5、APP 与 APLP2 是 APBB1 互作最为显著的蛋白。 

结论 敲低 Apbb1 基因促进 H9c2 心肌细胞增殖,过表达 Apbb1 基因抑制 H9c2 心肌细胞增殖,Apbb1 可能通过影响细胞周期 G2 / M 期影响心肌细胞增殖,KAT5 蛋白可能 与 APBB1 蛋白互作影响心肌细胞增殖。

阅读原文：Apbb1基因对心肌细胞增殖影响的探究.pdf