目的 探讨 miR-4539 抑制胶质瘤细胞生长的效应及相关机制。 

方法 采用 RT-PCR 法检测脑胶质瘤标本和 7 株胶质瘤细胞株中 miR-4539 的表达水平。 采用 CCK-8 法、流式细胞法、Western blot 法检测 miR-4539 在胶质瘤细胞中的作用。 采用双荧光素酶实验验证叉头盒转录因子 1(Foxp1)是否是 miR-4539 的直接靶点。 构建小鼠移植瘤模型,探讨 miR-4539 转染对小鼠肿瘤生长的抑制作用。 

结果  (1)miR-4539 在胶质瘤组织中的表达水平显著低于正常脑组织(P< 0. 05)。 miR-4539 在 7 个常用的人脑胶质瘤细胞系(U87、U251、U373、T98G、LN18、 LN229、SF295)中的表达量显著低于人正常脑胶质细胞株 HEB(P<0. 05)。 (2)与 miR-NC 组相比,miR-4539 转染 72 h 后,T98G 细胞和 LN18 细胞中 miR-4539 的表达水平都显著增加(P< 0. 05)。 CCK-8 检测显示,外源性 miR- 4539 过表达可显著抑制 T98G 和 LN18 细胞的增殖。 同时可诱导 T98G 和 LN18 细胞周期阻滞,G0 / G1 期细胞百分率增加,S 期细胞百分率降低,且细胞周期调控蛋白 cyclinD1、cyclinE1 和 Ser780 的表达水平也显著降低(P<0. 05)。 (3)荧光素酶报告显示,Foxp1 是 miR-4539 的直接靶点,可被 miR-4539 直接调控。 接种 T98G 细胞后 6 周,miR- 4539 转染组小鼠移植瘤平均体积、平均重量均显著小于 miR-NC 组(P<0. 05)。 (4)T98G 和 LN18 细胞过表达 miR- 4539 后,Foxp1mRNA 和蛋白表达都显著降低,免疫荧光结果也确认,miR-4539 降低了 Foxp1 在 T98G 细胞和 LN18 细胞中的表达。 

结论 miR-4539可通过靶向作用于 Foxp1 发挥抑癌因子效应,有望成为脑胶质瘤患者诊断和治疗的新靶点。

阅读原文：miR-4539通胶过质靶瘤向细作胞用生于长叉的头实盒验转研录究因子1抑制.pdf