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实验方法

贵州小型猪在生理、药理、病理学中的应用研究

2022年08月24日 浏览量: 评论(0) 来源:《中国实验用小型猪》 作者:冯书堂 主编 责任编辑:yjcadmin

(一)肾上腺素与去甲肾上腺素对血压的影响

两者都使血压升高。正常血压为16.9kPa,注射0.2mg去甲肾上腺素使血压迅速上升达32.5kPa。继血压恢复到11.7kPa时,注射0.1mg肾上腺素,血压上升到23.4kPa。以后又在血压恢复到16.9kPa时,注射0.1mg去甲肾上腺素,血压上升到28.6kPa,说明去甲肾上腺素对血压的影响强于肾上腺素。

(二)乙酰胆碱及肾上腺素对血压的影响

静脉注射乙酰胆碱10μg/kg,血压从16.9kPa下降到10.4kPa。继之注射硫酸阿托品2.5mg。再注射同样剂量乙酰胆碱,血压下降到13.3kPa。接着又注射阿托品2.5mg后,再注射同样剂量的乙酰胆碱,血压下降幅度很小,说明阿托品对乙酰胆碱的M样作用发生部分阻断作用。以后连续2次注射同样剂量乙酰胆碱,血压均下降,但当加大剂量至50μg/kg后,血压先行下降,随即上升到22.1kPa,然后缓慢恢复。说明阿托品对乙酰胆碱的M样作用发生阻断效应后,大剂量的乙酰胆碱可以兴奋干神经节和肾上腺髓质分泌肾上腺素引起血压上升的交感神经效应。

(三)迷走神经对血压及呼吸的影响

经戊巴比妥钠麻醉后记录正常血压为17.6kPa,呼吸26次/min。感应电流刺激迷走神经,血压下降到12.0kPa。切断一侧迷走神经,血压上升到18.5kPa。切断两侧迷走神经,血压上升到22.1kPa,呼吸21次/min,幅度加深。

感应电流刺激迷走神经中端。血压下降到11.7kPa。

(四)失血性休克实验

用20kg 6月龄阉割小型猪,正常血压为16.1kPa,由股动脉缓慢放血到100mL,血压下降到10.4kPa后又复升到13.3kPa左右,随着放血过程的进展,血压缓慢下降,直至放血到330mL,血压波动较大,放到400mL时,血压下降到3.9kPa,呼吸显著加快加深,后渐放血到500mL时呼吸停止,血压下降至0出现死亡。

(五)贵州小型猪药理实验研究

用贵州小型猪较之用鼠、兔、猫、猴,特别是用犬等所作的系列动物实验,均收到良好效果。因为贵州小型猪体重均在10~15kg,捕捉与固定比较容易。经驯养后的小型猪性情温顺,容易捕捉,待小型猪处于安静状态下,只要顺势抓住耳朵或提取前肢、后肢即可。如从小型猪身后捕捉更加容易。麻醉后作四肢及头部固定方法与犬相似,但因猪前肢较短,不易交叉固定。贵州小型猪的麻醉也便于操作,即:用3%戊巴比妥钠,经腹腔注射麻醉,每千克小型猪用量为1~1.5mL,视体质强弱略有变化,注射后10~30min出现明显麻醉状态,可维持4~6h,实验过程中根据实验要求的麻醉深度可中途给予3%戊巴比妥钠1.5~2mL,以保证实验的顺利进行。腹腔麻醉方法简单方便、安全可靠。实验熟悉后也可采用后肢静脉等部位麻醉。

1.不同途径给药对药物作用的影响  用3%戊巴比妥钠给香猪采取口服、肌内注射、腹腔注射或静脉注射。可以看出不同途径给药,药物起效时间有别,也可以看出巴比妥类药物随剂量增加而出现较明显的小剂量镇静,中剂量催眠,较大剂量麻醉等效应(表2-19)。

2.有机磷农药中毒及解救试验  从颈总静脉注入5%敌百虫2mL/kg后,观察小型猪中毒后症状表现,15~20min后,活动步行逐渐蹒跚,站立行走不稳,呼吸先加深加快后渐减慢,瞳孔渐缩小,唾液增多,大小便增多(3例中有1例可见大小便失禁),肌张力增加,肌震颤(由局部到全身)等均可见。中毒症状明显后(不出现昏迷为限),按不同体重即从颈总静脉注入2%硫酸阿托品1mL/kg或2.5%解磷定2mL/kg。单用阿托品者除肌震颤还存在外,其余中毒症状大部分逐步消除;单用解磷定者肌震颤解除而其他症状稍有减轻,阿托品与解磷定并用者中毒症状短时间内基本全部消除。如中毒症状未彻底消除者,可反复应用阿托品及解磷定,用至阿托品化及肌震颤完全消失为止。如要测定全血中胆碱酯酶活性变化情况,可在有机磷农药中毒前、后及解救后从静脉抽取全血来测定。

3.传出神经系统药物对血压影响  取小型猪及犬各1只,3%戊巴比妥钠1.5mL/kg,腹腔麻醉后,在颈部正中做5~7cm长切口,分离皮下及肌肉,暴露气管,于气管旁分离出颈总动脉,游离一段4~5cm,结扎远心端,在相距2~3cm的近心端放置动脉夹以阻断血流,在其两者之间用眼科剪作一V形切口,朝向心端插入已充满5%~7%枸橼酸钠液(或充满20~25mg肝素的生理盐水)的动脉套管,用手术线结扎固定,将水银检压计的压力调整到14.3~15.6kPa。

于该动物右侧(或左侧)腹股沟处做一长4~4.5cm的切口,分离皮下找出股静脉,将远心端结扎,朝向心方向插入已接滴定管的静脉套管,结扎固定,以备给药及补液用。

上述操作完毕后,开放颈动脉夹,先记录一段时间的正常血压后,再分组(拟肾上腺素药、抗肾上腺素药、拟胆碱药、抗胆碱药)依次给药,每次静脉给药后均沿股静脉插管滴注加入生理盐水(NS)5mL,以冲净滴管内的药物,待药物作用消失血压恢复正常后,再给下一个药物。

传出神经系统药物对贵州小型猪血压的影响,我们用于教学、科研实验多次,血压稳定,对药物反应敏感,与大家熟悉的传出神经药物对犬血压影响相比较,各药反应基本相似(表2-20)。

4.利血平耗竭递质的实验  提前2~3d给小型猪和犬静脉注射浓度为0.001的利血平2mL/kg,每天1次,连续给药2~3d,对照组给予等量的生理盐水,两组动物第3天后全部处死,即刻取出两侧肾上腺,小心剥除周围组织,用滤纸吸净血液,在扭力天平上称重后,置于冰箱内,保存30min后取出。按60mg肾上腺加1mL pH3.5的NS于组织匀浆器中研磨成匀浆,分别将两种匀浆置于离心管,以2500~3000r/min的速度离心10min后,取上清液备用。

另取小型猪和犬各一只,作急性血压实验手术准备,待血压平稳后,按顺序从股静脉注入药物和两种肾上腺匀浆液,用利血平耗竭两种动物所得的肾上腺匀浆液,对正常动物血压的影响进行比较,结果相似,同样能看出利血平耗竭传出神经末梢儿茶酚胺类递质的作用(表2-21)。

5.利尿药对小型猪及犬的利尿作用  取健康小型猪及犬各1只,称重,用3%戊巴比妥钠1mL/kg静脉注射或腹腔注射麻醉后,仰缚于手术台上,做股静脉插管接输液装置。然后做下腹正中6~8cm的纵向切口直至耻骨联合处上1cm处(如雄性动物则稍偏一侧,以避开生殖器),分离皮下、脂肪及肌肉,打开腹腔找出膀胱,并将膀胱由下往上翻,找出左右两根输尿管,用眼科蚊式止血钳分离1cm长输尿管,穿线两根,一根结扎近膀胱端,提取此线,朝肾脏方向作一斜形切口,用塑料导管插入8~10cm深,以另一线结扎紧,两线又合扎,以免导管滑脱。按顺序静脉注射给药后记录尿量(表2-22)。

6.利胆试验  取健康小型猪及犬各1只,麻醉方法同前。仰卧,于右上腹做5~7cm切口、分离、打开腹腔找出十二指肠肠系膜中的胆管,轻轻剥离,在胆管下穿2条线,结扎远肝端乳头部,向肝叶方向做V形剪口插入引流管,可见浅黄色(或金黄色)胆汁滴出。证实插管准确无误后,结扎固定,稳定5~10min后,用刻度管收集30mL胆汁作为药前胆汁量。然后从十二指肠注射ivNS及10%去氢胆酸,各观察30min,收集胆汁记量,结果见表2-23。

7.讨论  从以上多项实验结果表明,贵州小型猪对各系统药物反应灵敏,重复性好,对实验反应均衡,数据可靠。加之小型猪对急性实验损伤耐受性强,多项实验反应与犬相似。小型猪捕捉安全,容易保定,麻醉方法简便易行。其他学者在贵州小型香猪配种繁殖饲养方面的研究,在解剖、组胚、生理等方面的研究,还有在其他科研实验研究中的应用,都进一步证实贵州小型猪是一种新型的药理学教学、科研实验动物。

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