1.病毒及攻毒  Zaire亚型豚鼠适应株，攻毒剂量为10的3.8次方pfu/0.5ml PBS，右上肢内侧皮下注射。

2.实验动物  SPF级strain-13成年豚鼠。

3.实验环境  BSL-4级实验室。

4.实验步骤  每天观察动物的一般状况，包括眼、鼻、口、脸、耳、爪、四肢、肛门、尾、被毛、活动和精神状况。攻毒后每天称重1次，攻毒后1～5、7、9d每天安乐相同数量的豚鼠(3只左右)，取血及如下组织：淋巴结(包括下颚、腋下、肠系膜、及膝后窝部)、纵隔膜、脾、肝、肺、心、脑、肾、舌、胃、食管、气管、小肠、盲肠、结肠、膀胱、生殖系统、扁桃体、唾液腺、胸腺、胰腺、甲状腺、肾上腺及骨髓。同时设立未攻毒豚鼠对照。

5.病毒分离  解剖时取如上组织，研磨处理后接种Veto细胞，每天观察细胞病变。

6.病毒RNA的检测  取如上组织放入1ml裂解液(Qiagen)中，用研磨器充分研磨，离心后取上清放入buffer RLT(已加入1％巯基乙醇)350μl，4℃，13000转/分离心3min，将上清转移至新1.5ml微量离心管中。提取样品病毒核酸，再将RNA反转录成cDNA，通过荧光定量PCR仪直接测定病毒核酸载量。

7.病毒抗体检测  动物在不同时间点处死采血分离血清，－80℃下保存备用，用特异性ELISA试剂盒对抗体进行检测。

8.病理观察  解剖时取如上组织，详细观察各组织的形态变化，并将各组织用10％甲醛固定，石蜡包埋，常规病理组织切片处理后，HE方法染色后，镜检观察。

9.建模结果  豚鼠约5d后开始出现不进食、发热、脱水等临床症状，8～11d后无一例外的死亡，但并不伴随出血的现象。肝和脾中可于攻毒后2d检测到病毒，3d时病毒扩散至肾、肾上腺、肺及胰腺，随后组织平均病毒效价逐步上升并于9d时达到峰值(图14-11、图14-12、图14-13和图14-14)，病毒血症于7d时达到近100 000pfu/ml的峰值。感染的豚鼠同时还逐渐出现凝血时间(prothrombin time, PT)延长等现象。