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模型制备

高脂饲料加空气干燥术建立颈动脉粥样硬化动物模型

2022年10月19日 浏览量: 评论(0) 来源:《常用医药研究动物模型》 作者:主编 苗明三 朱飞鹏 责任编辑:yjcadmin

1.造模材料  动物:雄性日本大耳白兔,体重2.0~2.5kg,4月龄;药物:2%胆固醇的颗粒饲料,速眠新,庆大霉素。

2.造模方法  正常组喂普通颗粒兔饲料;模型组,喂含2%胆固醇的颗粒饲料,1周后实施颈动脉内膜空气干燥术,术后继续高脂饲料喂养。所有动物均单笼喂饲,饮水不限,自由摄食,每天每只进食150g饲料。

内膜空气干燥术:实验动物术前12h禁食,不禁水。在严格无菌条件下,动物经速眠新注射液(0.2ml/kg)肌肉麻醉,颈部脱毛清洁消毒后,作颈正中切皮,于甲状软骨上方水平分离左侧颈总动脉,长约2.5cm(如发现颈动脉小分支,则予以单线结扎),两端以动脉夹阻断血流,4.5号头皮针尽可能平行于血管纵轴方向穿刺进入阻断血管的两端,生理盐水冲洗置换出管腔内的血液后,接上已调节好流量为250ml/min的气流,历时5min,造成内皮干燥,然后管腔内重新充满生理盐水,放开临时动脉夹恢复血流。湿润棉片轻轻压迫穿刺点3~5min止血。解开侧支结扎线,恢复血供。于气管右侧解剖右侧颈动脉,但不结扎颈动脉小分支,行右侧颈动脉气体干燥损伤,方法同上。缝合皮肤创口并包扎。术后肌内注射庆大霉素预防感染。

3.造模原理  利用高脂饲料加空气干燥术在较短的时间内诱发兔颈动脉粥样硬化。

4.造模后病理变化  肉眼大体观察:正常组兔颈动脉柔软有弹性。模型组颈动脉2周后出现明显的管壁僵硬、增厚,8周及12周组上述改变加重。75%实验动物颈动脉有小侧支,结扎后干燥效果更好。48根实施手术血管,镜下斑块发生率对比:左侧87.5%,右侧54%,两者比较有显著差异;双侧血管重度狭窄比例对比:左侧重度狭窄比例为45%,而右侧重度狭窄比例仅为8.3%,两者比较有差异。左侧成模率高,重度狭窄明显高于右侧,考虑与右侧未结扎小分支血管,未达到有效干燥所致。

光镜下HE染色观察:正常组颈动脉内皮细胞完整,单层紧贴内弹力板。中层平滑肌细胞排列整齐,呈长形或椭圆形,细胞质呈嗜酸性红染,无明显脂质沉积。模型组成功复制了As全部病理改变过程,在第8周病变已趋成熟,中重度狭窄大部分集中于这一阶段,中度狭窄的粥样硬化斑块中可见到大脂质核心,薄纤维帽,斑块肩部小溃破等不稳定斑块特点。在重度狭窄血管腔,内膜增生的部分细胞团中有新生滋养血管。12周组多为成熟粥样斑块,斑块内可见坏死钙化区域。

5.注意事项  手术器械严格消毒,防止手术感染,手术创伤应尽可能小,严格无菌操作。


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