中医认为“证”是机体在疾病过程中某一阶段的病理概括，不只是一个症状或一个综合征群。它包括了病变的部位、原因、性质以及邪正的关系，反映了疾病发展过程中某一阶段的病理变化的本质。脾虚证则是脾功能不足而导致的某一阶段的病理概括。

中医认为脾主运化水湿和水谷精微，主升清，主“涎”，“涎”为“脾液”。脾虚则运化失常，导致腹胀、大便溏泻、食欲不振、全身乏力、四肢无力、自汗、气短，面色苍白少华、消瘦等症状。脾主统血，脾虚则不统血，由此可见出血、贫血等症状。根据上述病理改变，中医往往还要结合舌象和脉象来诊断。但是舌象和脉象难以在小动物身上得到，故复制中医证的动物模型还要考虑到一些有关的指标，进行综合分析，才能得到一个完整的中医对证的诊断。

因此，我们拟定了以下几个项目作为判别脾虚的参考指标：

(1)关于“脾生涎”、“涎为脾液”、脾主运化方面  以唾液淀粉酶为指标。临床研究表明，脾虚者的消化系统功能减退，表现为患者的唾液淀粉酶活性减弱及其他消化酶活性都减弱。

(2)关于脾主升清，主气方面  选择了血清免疫球蛋白和白细胞为指标。有些资料报道，脾虚患者细胞免疫水平较正常人低下。

(3)关于脾统血方面  选择血红蛋白、血小板为指标。因脾虚患者有出血和贫血的现象。

(一)实验设计

1.以方药“反证”脾虚证  在历代临床中，用四君子汤(党参、白术、茯苓、甘草)治疗脾虚证有肯定的疗效。故采用给脾虚动物灌胃四君子汤，并观察其是否能纠正脾虚证各类主要症状的方法来考察脾虚模型是否成功。

2.贵州小型猪具有动物的选择优势  小型猪主要优点是生命周期短，价廉易得；贵州小型猪的组织解剖、消化系统、免疫系统及营养代谢各方面都比常用的其他实验动物更接近人。所以，小型猪来作脾虚动物模型更为恰当。

3.造型因素的选择  一般尽量采取符合中医理论的方法，关于脾虚动物模型复制的造型因素，目前有以下几种：

(1)苦寒泻下中药  大黄。大黄水浸煎剂，胃饲法。

(2)西药利血平  给动物注射。

(3)低蛋白饮食。

(4)饮食失节  中医认为饮食失调，用饥饿方法、过渴、损伤元气导致脾胃虚弱。再饮用大黄液造模。大黄性苦寒，归脾胃大肠经。过量或长期服用此种苦寒药会伤元气，耗阴血，苦寒伐胃，损伤脾胃就会出现脾虚的临床症状和病理变化。大黄经小肠吸收后，其有效成分大黄素在由大肠进入肠腔刺激大肠蠕动，增加排便速度；大黄还抑制Na+一K+一ATP酶的活性，因而抑制Na+由腹腔转运至细胞，使水分滞留肠腔，增加容积，肠道扩张加速排便。另外，大黄中的蒽醌经小肠吸收进入大肠也有加速排便的作用，以上几种因素都导致大便溏泻。大黄还会引起浅表胃炎和抑制消化酶的活性。所以较长时间用过量的大黄水浸煎液灌胃动物，动物会出现食欲不振，摄食量少，消化不良，疲乏，皮毛松散等症状，与人类脾虚临床表现极为相似。因此，选择中药大黄作小型猪脾虚动物模型复制的造型因素是符合中医的基本理论要求的。

(二)脾虚模型的复制

选择实验小型猪：8月龄16只，雌雄兼有，随机分为造型组和对照组，称重标号。公猪体重13.47±1.2kg；母猪体重14.67±1.06kg。造型组用一定量的大黄水浸煎剂空腹灌肠，每天一次；对照组不灌大黄液，只灌胃给予大黄液等量的自来水。灌胃后正常喂食饲养。在此期间记录。连续8d造型组形成脾虚后，再将此脾虚组分成A、B两组。A组灌胃四君子汤使其复键8d作为方药“反证”，验证造型是否成功。B组灌胃与四君子汤等量的自来水作为自然恢复组。第8天后两组都恢复正常。只是A组复健快速且各项指标都恢复正常；B组恢复且各项指标接近正常组。证明造型成功。

(三)实验指标和结果

1.观察动物外形指标

对照组：动物毛色光亮，活泼好动，反应灵敏，食欲好，大便正常。

造型组：最后出现动物少动、纳呆、便溏、皮毛枯槁，食欲差等一系列脾虚症状。

2.唾液淀粉酶测定

造型组：2459.05±905.00V/C；

对照组：3633.20±853.45V/C。

从测定结果可知，唾液淀粉酶活力与对照组比较P＜0.005有显著性差异，这表明脾虚唾液淀粉酶总活力明显降低。消化酶活力降低说明了食欲不振的原因。

3.血清免疫球蛋白的测定

(1)血清免疫球蛋白IgG

对照组：7.34±1.37g/L；

造型组：5.96±1.02g/L。

两组比较P＜0.01。

(2)血清免疫球蛋白IgA

对照组：601.79±106.63mg/L；

造型组：537.36±87.74mg/L。

两组比较：P＜0.01。

4.白细胞计数

对照组：(16.98±3.62)×10的9次方/L；

造型组：(10.26±2.54)×10的9次方/L。

两组比较：P＜0.01。

5.关于统血指标

(1)血红蛋白计数测定(计数板法)

对照组：124.2±9.9g/L；

造型组：105.6±9.5g/L。

两组比较：P＞0.05。

(2)血小板计数(计数板法)

对照组：(380±50.93)×10的9次方/L；

造型组：(310±46.33)×10的9次方/L。

两组比较：P＞0.05。

经过上述实验结果，说明选取上述几项指标是符合中医的基本理论且切实可行的。有以下优点：贵州小型猪体型小、性情温驯，便于实验操作管理。对实验耐受性强，反应均衡，重复性好。尤其是采样方便，一次取样多，便于作多个指标动态观察。采取唾液样量多易获，其他小动物是不可相比的。还可观察到整个实验过程中舌象和脉象，为复制人类疾病中医证的研究和中药、民族药等新药研制开发提供了一个最佳的新平台。