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模型制备

过大球囊扩张配合高脂饮食建立小型猪冠状动脉粥样硬化模型

2022年10月27日 浏览量: 评论(0) 来源:《常用医药研究动物模型》 作者:主编 苗明三 朱飞鹏 责任编辑:yjcadmin

1.造模材料  动物:贵州小型猪,雌雄不限,月龄3~4个月,平均体重(14.2±3.4)kg;药物:基础饲料(主要成分为玉米64.0%、豆饼14.5%、麸皮12.0%、鱼粉5.0%、骨粉2.0%、食盐0.5%),高胆固醇饲料(主要成分为蛋黄粉10.0%、胆固醇6.0%、猪油8.0%、花生油8.0%、食盐1.2%)。阿司匹林,地西泮,氯胺酮,硫喷妥钠,胺碘酮,肝素,泛影葡胺,青霉素;器械:球囊导管。

2.造模方法  动物购进后单笼喂养,编号,一周基础饲料后喂高胆固醇饲料,按每天25g/kg。高脂饲料上午一次性给予,下午添加基础饲料,24h供水。4周后,随机抽取5只作为空白对照组,对其余动物行冠状动脉内膜机械性剥脱术。

常规术前准备,术前1天予阿司匹林325mg,术前15min予地西泮、氯胺酮腹腔内注射行诱导及基础麻醉。建立耳缘静脉通道,胺碘酮75mg静脉。推注预防心律失常并准备除颤设备,硫喷妥钠加入生理盐水中持续静滴维持麻醉,根据动物的麻醉深浅调节滴速。

动物行右侧股动脉穿刺,经导丝送入用肝素冲洗过的G动脉鞘管,注入肝素200U/ kg,并每隔1h静脉注射肝素2000U。

冠状动脉造影(coronary angiography, CAG)在数字减影血管造影(digital subtraction angiography, DSA)下将6F JL造影导管沿动脉鞘管至升主动脉中段,记录动脉压,缓慢推送造影管至冠状动脉开口,注射75%泛影葡胺行左冠状动脉造影。必要时重复进行。用6F JR造影管行右冠状动脉造影。术中进行心率和动脉压测定。过大球囊扩张术为将7F JL指引导管经动脉鞘管送至左冠状动脉开口处,通过指引导管将PTCA导丝送至前降支远端,将球囊导管沿PTCA导丝进入左冠状动脉前降支中段(以第一对角支为标志),行球囊扩张,球囊与冠状动脉直径之比为1.3:1,以810.6~1418.55kPa扩张球囊,每次30s,间隔1min,共扩张3次,保留球囊内压力来回拖拉球囊3次,造成动脉内膜机械性剥脱,回抽造影剂,将球囊抽成负压状态撤出,重复CAG,评价血管的通畅性和损伤程度。送回单笼喂养,继续高胆固醇饮食,静脉给予400万U青霉素肌内注射3天,常规预防感染。16周后按上述方法成功麻醉及从另一侧股动脉行CAG,观察病变血管狭窄的长度、程度、病变类型、有无钙化及钙化程度。

3.造模原理  冠状动脉左前降支采用过大球囊扩张术行内膜机械性剥脱配合高脂饮食建立猪冠状动脉粥样硬化模型。

4.造模后变化  小型猪冠状动脉管腔壁光滑,管腔通畅,与人类冠状动脉的分支和分布极为相似,但其侧支循环较稀疏,吻合支细小且较少。

成功行过大球囊扩张的模型动物CAG复查均出现不同程度的冠状动脉硬化,有56%扩张血管发生明显粥样硬化性狭窄(≥50%),最明显处达90%,狭窄有偏心型和同心环型,狭窄长度约为10~20mm。未经球囊扩张的冠状动脉及对照组动物,CAG均未见明显动脉硬化及狭窄。

5.注意事项  麻醉程度以动物心率较平稳,口腔肌群已经松弛,用力拉开时没有阻力为好,并要注意随时调整;麻醉过深,有可能引起动物死亡;过浅则不利于操作,增加意外创伤的机会;气管插管动作要轻柔准确到位,尽量避免重复操作,插管的口径要细,最好不用带有气囊的插管;选择直径1.3:1、长度1~1.5cm的球囊比较适合于进行内膜剥脱;球囊压力810.6~1418.55kPa,每次30秒,间隔1分钟,共扩张3次,保留球囊内压力101.33~303.98kPa来回拖拉球囊3次;由于其冠状动脉侧支循环较稀疏,吻合支细小且较少,球囊扩张时易于发生室颤。术前除常规准备外,可预防性静推胺碘酮75mg,操作中如出现室颤,迅速将球囊从冠状动脉退至主动脉内,并立即电击复律。


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