目的 探讨 miR-214 对异丙酚麻醉诱导的神经元损伤的保护作用及生物学机制。

方法 7 日龄 SD 雄性大鼠随机分为 4 组(每组 15 只):生理盐水组(NS)、异丙酚麻醉开腹探查组(模型)、miR-NC 组和 miR-214 组。 除 NS 组外,其余组别建立异丙酚麻醉开腹探查模型。 miR-NC 组和 miR-214 组分别在麻醉前将 miR-NC-agomir 或 miR-214-agomir 注射到海马内。 采用免疫荧光法检测海马 mTORC1 的表达,TUNEL 染色检测海马组织细胞凋亡, RT-qPCR 分析海马组织中 miR-214 表达。 分别将 miR-214 抑制剂和 mTORC1 抑制剂转染入 HT22 海马神经元细 胞,然后暴露于异丙酚。 采用流式细胞术分析细胞的存活情况和 Western blot 分析 TEFB、C-caspase3 蛋白表达。

结果 与 NS 组相比,模型组大鼠海马中 miR-214 明显下调(P<0. 05),并且海马神经细胞凋亡显著增加(P<0. 05)。 与模型组相比,miR-214 组海马神经元凋亡减弱(P<0. 05)。 生物信息学预测证明 mTORC1 和 miR-214 之间存在特 异性结合位点。 免疫荧光检测显示,与 NS 组比较,模型组诱导海马神经组织中 mTORC1 表达增加(P<0. 05),miR- 214 治疗显著降低了 mTORC1 表达(P<0. 05)。 此外,与 NC 对照组相比,si-mTORC1 转染导致暴露于异丙酚的 HT22 海马神经元细胞的凋亡率显著降低,并且 TFEB 表达显著增加(P<0. 01),以及 C-caspase3 降低(P<0. 05)。 而 miR-214 抑制剂转染显著逆转了 si-mTORC1 的保护作用以及诱导的 TFEB、C-caspase3 蛋白表达的变化( P< 0. 05)。

结论 miR-214 可能通过 mTORC1-TFEB 通路减轻异丙酚神经毒性,提高神经元的存活率。

原文内容：miR-214对异丙酚麻醉大鼠术后神经元损伤的保护作用.pdf