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TNFAIP1对RhoA的泛素化调节在黑色素瘤进展中的作用
目的 探讨肿瘤坏死因子 α 诱导蛋白 1(TNFAIP1)介导的 RhoA 泛素化在黑色素瘤增殖和侵袭中 的作用。
方法 进行生物信息学分析以检测黑色素瘤中 TNFAIP1 和 RhoA 的表达,然后测定黑色素瘤患者的临床 组织的表达。 分别通过 RT-qPCR 和蛋白质印迹测定评估基因或蛋白质的表达。 体外构建 TNFAIP1 和或 RhoA 过 表达的人皮肤黑色素瘤细胞系 WM2664 和 A2058 模型。 细胞增殖和侵袭分别通过集落形成、CCK-8 和 Transwell 测 定进行研究。 将表达 TNFAIP1 和 Ub-K48 的质粒共转染到处理过的黑色素瘤细胞中,同时进行免疫沉淀测定以确 定 TNFAIP1 和 RhoA 之间的相互作用。 建立体内模型以确认 TNFAIP1 和 RhoA 对肿瘤生长和转移的影响。
结果 与癌旁正常组织相比,肿瘤组织中 TNFAIP1 表达显著降低(P<0. 01)和 RhoA 表达显著升高(P<0. 01)。 TNFAIP1 高表达的黑色素瘤患者预后良好,而具有 RhoA 高表达的黑色素瘤患者预后不良。 在体外,TNFAIP1 的过表达显著 抑制黑色素瘤细胞的增殖和侵袭。 TNFAIP1 介导 K48 连接的 RhoA 泛素化以促进其降解。 进一步的救援实验发 现,RhoA 过表达在体内和体外显著抑制了 TNFAIP1 过度表达在黑色素瘤增殖和侵袭中的调节作用。
结论 TNFAIP1 在黑色素瘤中发挥肿瘤抑制作用,其通过诱导 RhoA 泛素化抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭。
阅读原文:TNFAIP1对RhoA的泛素化调节在黑色素瘤进展中的作用.pdf
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