目的 本研究旨在分析布鲁氏菌外膜蛋白 OMP25 诱导机体产生的免疫反应。

方法 采用 PCR 方 法扩增羊种布鲁氏菌 16M 的 omp25 基因,克隆至 pET-32a 质粒。 重组质粒 pET32a-OMP25 转化至大肠杆菌 BL21 (DE3)中,并诱导表达。 利用 Ni²⁺柱纯化试剂盒进行蛋白纯化。 用纯化的重组蛋白(rOMP25)和 Rev. 1 疫苗株免疫 小鼠,检测小鼠脾细胞中 IFN-γ 和 IL-2 的水平,以及小鼠血清中 IgG 抗体和抗炎因子 IL-10 水平,并用 Western Blot 检测反应原性。

结果 (1)omp25 基因大小为 642 bp,编码 214 个氨基酸,rOMP25 大约在 40. 8 × 10³ 处出现蛋白条 带,纯化后为单一条带。 (2)用 t 检验方法统计显示,rOMP25 免疫小鼠后,诱导脾细胞产生 IFN-γ 和 IL-2 的水平, 小鼠血清中 IgG 和 IL-10 的水平与 Rev. 1 组相似,显著高于对照组(P < 0. 01)。 (3) Western Blot 检测结果显示, rOMP25 具有较好的反应原性。

结论 rOMP25 具有较好的免疫原性和反应原性,为进一步研究 OMP25 蛋白的功 能,以及研制相关疫苗提供了生物材料。

阅读原文：布鲁氏菌外膜蛋白OMP25诱导BALB╱c小鼠免疫反应的分析.pdf