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模型制备

大鼠冷冻伤血管源性脑水肿模型

2023年01月09日 浏览量: 评论(0) 来源:《常用医药研究动物模型》 作者:主编 苗明三 朱飞鹏 责任编辑:yjcadmin

1.造模材料  动物:雄性Wistar大鼠,体重200~230g;药物:戊巴比妥;器械:小口径液氮冷冻器。

2.造模方法  1%戊巴比妥(45mg/kg)腹腔麻醉,待角膜及翻正反射消失后,俯卧位固定于立体定位仪上,碘氟消毒头部皮肤,沿正中切开头皮,分离骨膜,暴露左顶颅骨。将内盛丙酮的冷冻器直接浸泡入液氮中预冷,使冷冻器温度为液氮温度(-196℃)。将直径5mm冷冻头垂直置于矢状缝左旁开5.5mm为圆心的骨面上(冷冻头前缘至冠状缝),压力108g,冷冻60s,造成左顶叶脑皮层的冷冻伤。手术室温度为25℃,术中电灯泡照射维持肛温为37~37.5℃。术毕自由进食水。

3.造模原理  脑冷冻伤导致动物脑水肿。

4.造模后的变化  脑冷冻伤后2h伤侧脑组织含水量与假手术组相比即显著升高[假手术组(78.06±0.53)%,模型组(79.04±0.58)%],水肿程度逐渐加重至24h最高[模型组(81.19±0.90)%];创伤对侧脑组织含水量在各时间段均无明显变化。

HE染色光镜所见:冻伤后2h左侧大脑皮质冻伤灶中心神经元变性、坏死明显,6h和24h较2h要严重,多数神经细胞已坏死消失、液化,中性粒细胞渗出,小胶质细胞聚集;坏死区周围水肿明显,细胞外间隙扩大,细胞及微血管周围腔增大,白质神经纤维间隙扩大,可见粉红色水肿液。假手术组大脑皮质神经元结构清晰,未见异常。

电镜所见:冻伤脑组织内皮细胞肿胀,质膜吞饮小泡含量明显增加,星形胶质细胞终足肿胀,髓鞘紊乱,血管周围间隙增宽,毛细血管内有炎细胞浸润。假手术组超微形态未见异常。

5.注意事项  使用立体定位仪固定大鼠。在冷冻的过程中,如使用一般的手术台,因头部受压容易导致呼吸道不畅,可发生不同程度的缺氧或窒息,从而影响模型的稳定性和可比性;再者,通过立体定位仪固定调整,顶骨可更平整,利于冷冻头与颅骨良好接触;外界温度要求基本相同,减少对探头温度的影响,本模型的制作在空调房间25℃情况下进行;冷冻头对颅骨的压力可影响血管源性脑水肿的程度,本实验采用恒定的压力为108g。


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