血虚寒凝血淤证贵州小型猪模型的研究
(一)实验方法
贵州小型猪21头随机分成3组,即空白对照组、血淤模型组、当归四逆汤治疗组,每组7头。小型猪前腔静脉第一次采血,采血量为总血量的2.5%(占体重的0.15%),次日将小型猪放入0~1℃的冰水中20min,冰冷刺激一天一次,连续4d。第6天前腔静脉第二次采血,采血量为总血量的2.5%(占体重的0.15%),采血次日将小型猪放入0~1℃的冰水中20min,冰冷刺激一天一次,连续4d。
(二)实验分析
1.实验观察指标 观察动物的体征变化;检测血常规,血液流变学,凝血功能,微循环,超氧化物歧化酶(SOD)、血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列环素F1α(6-KeTo-PGF1α)。
2.模型设计 本课题根据中医病因病机采用失血致血虚、冷冻致寒凝建立了血虚寒凝血淤证动物模型,根据血虚可导致气虚,气虚而无力推动血行以致血脉淤滞,形成血淤,即“若血虚亏少,虽有气之推动,阳之温煦,也行而缓迟,以至滞而为淤”;寒为阴邪、寒入于经,经脉拘急,血得寒则凝,无论阳虚内寒或外感寒邪,均可致血液凝滞,运行不畅而成寒凝血淤,血液凝涩而不能畅通,常可因之而淤滞即“寒邪伤阳,寒凝血淤”,采用放血致血虚,冰冷刺激致寒凝,在中医基础理论的指导下复制模型,其方法简单,符合中医临床病证,符合人类因各种理化原因、跌打、外伤、刀伤等而致失血后受寒的疾病(没有化学药物的毒性刺激和没有手术创伤的损害)。模拟症状:动物出现畏寒蜷缩弓背,精神萎靡,反应迟钝,行动缓慢,毛松竖起脱落,耳、尾、爪、舌紫暗,体温下降,心跳减慢,脉涩或结代。这均是中医临床血虚寒凝血淤证的典型症状。
3.实验室检查 血常规、血液流变学、凝血机制、超氧化物歧化酶(SOD)及血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列环素F1α(6-KeTo-PGF1α)有明显的变化,微循环障碍异常等。符合现代血淤证的诊断标准。
4.方药反证 在历代中医临床中,用当归四逆汤(当归、桂枝、白芍、木通、细辛、甘草、大枣)治疗血虚寒凝血淤证有特效。故采用当归四逆汤灌胃治疗,观察其是否能纠正血淤证各类主要症状,反证模型是否成功。
以上几点充分说明,本动物模型是按中医基本理论,按与人类自然发病极相似的,没有化学药物毒性刺激和手术创伤损害的,经当归四逆汤治疗好的“血淤证”动物模型。当归四逆汤能明显改善大鼠和小型猪的血虚寒凝血淤诸证。本研究为开发研制治疗血淤证新药提供一个最佳平台。可用数码相机或摄像机记录下整个病程中舌形、舌质、舌苔、颜色等变化过程;用脉相仪记录下脉象的变化。对研究中医治病“望、闻、问、切”的四诊客观指标和中医证的机制将会发挥重大作用。
(三)结论
失血和冰冷刺激并用可成功复制出“血虚寒凝血淤证”贵州小型猪模型,符合中医病因病机基本理论和中医证候特点。当归四逆汤可改善血虚寒凝血淤证贵州小型猪模型的症状、体征及病理变化。贵州小型猪“血虚寒凝血淤证模型”是中医舌诊、脉诊及“证”本质研究理想的人类疾病动物模型。
(四)问题与展望
通过实验,对今后的研究提出一点感想:深入研究血淤证舌象和脉象的研究,增加定量研究内容,使其客观化。进一步选择出少而精的鉴别判断检测“指标”;淤证的形成是一个慢性的过程,以后模型复制要设法体现其慢性的动态改变;要以困扰现代人类健康的难治性疾病为切入点进行深入研究,开展病证结合的研究,使中医“病证结合”的论治体系得到充实和创新,从而推动中医证研究的深入,使中医药成为未来医学不可替代的支柱;广泛应用本模型,开发研制治疗血淤病证及其他中医病证的新药。