目的 建立血管内皮细胞连接蛋白 43(connexin 43, Cx43)条件性敲除小鼠模型,并对其血管舒张/ 收缩功能进行检测。

方法 将 8 只 Cx43 ^{flox / flox}小鼠与 C57BL/ 6 品系野生型(wild type, WT)小鼠交配,子代小鼠继 续与 C57BL/ 6 小鼠回交 9 代进行基因背景转换;再将 Cx43 ^{flox / +}小鼠与血管内皮细胞特异性表达 Tie2-Cre 重组酶小 鼠(以下简称 Cre 小鼠)交配,获得 Tie2-Cre / Cx43 ^{flox / +}小鼠。 利用鼠尾 PCR 试剂盒进行基因型鉴定,Western Blot 法 和免疫荧光法检测小鼠肠系膜上动脉(superior mesenteric artery, SMA)中 Cx43 表达。 利用离体张力测定技术检测 SMA 血管舒张/ 收缩功能,包括去甲肾上腺素诱导的收缩反应性和乙酰胆碱诱导的舒张反应性。

结果 PCR 电泳 和血管蛋白表达检测结果证实 Tie2-Cre / Cx43 ^{flox / +}小鼠成功构建,肠系膜上动脉中 Cx43 蛋白表达与野生型小鼠相比 明显降低(P < 0. 01)。 与 WT 小鼠相比,部分敲除血管内皮细胞 Cx43 后使乙酰胆碱诱导的内皮依赖的血管舒张反 应性显著降低(P < 0. 01)。

结论 采用 Cx43 ^{flox / flox}小鼠与血管内皮细胞特异性表达 Tie2-Cre 重组酶小鼠成功构建 血管内皮细胞条件性敲除 Cx43 杂合子小鼠,该小鼠的肠系膜上动脉中 Cx43 表达降低,且舒张反应性明显降低,预 期可为研究 Cx43 及其相关结构在血管功能调节中的作用提供动物模型。

阅读原文：血管内皮细胞条件性敲除Cx43杂合子小鼠模型建立及其血管功能变化的研究.pdf