首先要准备适宜小鼠生活的环境条件，动物设施的温度、湿度、照度或噪音分贝都是有要求的，可参考国标《实验动物 环境及设施》。如果没有标准化动物饲养设施的情况下，主要关注动物房的温湿度，保持安静和12小时的昼夜明暗交替，小鼠作为夜行性动物大多数活动（比如说交配）都在夜晚进行。

繁殖小鼠需要精心挑选，合笼可用8周龄雄鼠和6周龄雌鼠。种鼠要挑选毛色光亮、体格健壮、行动敏捷的小鼠；再检查雌雄鼠生殖器，排除雄鼠可能打架造成生殖器损伤，雌鼠可能有阴道纵膈等异常。最重要的是确定种鼠能够繁育出我们需要的基因型，不同品系小鼠的繁育方案也有差别。

合笼时按雄雌比例1：1或1：2（2只雌鼠可以更好的照顾小仔哦）先放入雄鼠再放雌鼠，雄鼠要在配繁中占主导地位。20天后检查雌鼠是否怀孕，孕鼠要避免过度打扰，噪音过大雌鼠受惊吓可能导致食仔。

雌鼠发情周期阴门外观：A发情前期；B发情期；C发情后期；D间情期

还有一种较快速的检栓配繁方式，先单独饲养雄鼠3天，下午16：00~17：00挑选发情雌鼠合笼，发情雌鼠可观察到阴道口红肿湿润，褶皱明显，此时合笼受孕率较高。

小鼠阴道栓

第二天早上8：00检查雌鼠阴道口是否能够看到白色的阴道栓，有阴道栓说明交配成功，大部分交配成功的雌鼠20天后生仔。小仔19~21日龄时耳朵竖立，可以四处跑动，能够自主采食固体饲料，可按性别分笼饲养啦。