目的 探索自噬与 CKD 血管钙化之间的关系,以及自噬在 CKD 血管钙化中的作用。

方法 首先将 30 只 SD 大鼠随机分为对照组(Control 组,15 只)和腺嘌呤及高磷饮食诱导的模型组(CKD 组,15 只)。 免疫组化 检测主动脉中 α-SMA、RUNX2、LC3B 及 Beclin-1 蛋白表达,新鲜主动脉做钙含量测定,进一步做它们之间的相关性 分析。 再构建 β-GP 诱导的主动脉平滑肌细胞(aorta smooth muscle cell,ASMC)钙化模型。 电镜检测细胞内自噬小 体,免疫荧光及 Western blot 检测 LC3B 蛋白。 自噬抑制剂 3-MA 及激活剂 RAP 干预自噬后,采用免疫组化、 Western blot 检测 ASMC 中 α-SMA、RUNX2 蛋白表达变化,茜素红染色及钙含量检测 ASMC 钙化情况。

结果 模型 组成功建立 CKD 血管钙化模型。 与对照组相比,模型组主动脉 α-SMA 蛋白表达下降,RUNX2、LC3B、Beclin-1 蛋白 表达及钙含量升高。 Beclin-1 及 LC3B 蛋白表达分别与主动脉钙含量及 RUNX2 蛋白表达呈正相关。 β-GP 诱导 ASMC 自噬小体增加,LC3B 荧光斑点增多,LC3BII 蛋白表达增强(P<0. 01)。 RAP 激活自噬后减少 ASMC 钙沉积 及钙含量(P<0. 05),减少 RUNX2 蛋白表达(P<0. 05),促进 α-SMA 蛋白表达(P<0. 05);3-MA 抑制自噬后结果与 之相反。

结论 CKD 血管钙化同时存在自噬激活,自噬在 CKD 血管钙化中可能具有内源性保护作用,自噬有望成 为 CKD 血管钙化新的治疗靶目标。

阅读原文：自噬在慢性肾病血管钙化中的作用研究.pdf