1.造模材料 动物:雄性Wistar大鼠,体重250~300g;药物:10%水合氯醛。
2.造模方法 用10%水合氯醛(300mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠,仰位固定,颈部正中切口,暴露右侧颈总动脉,向外牵引腹肌及胸锁乳突肌,由颈总动脉分叉处向头端依次游离,结扎并剪断颈外动脉的分支——枕骨下动脉和甲状腺上动脉,在颈外动脉远端结扎,切断颈外动脉使其主干游离备用,然后分离颈内动脉,用丝线在颈外动脉根部打一松口,夹闭颈总动脉和颈内动脉;将尼龙线(长4cm,直径0.20~0.25mm)经颈外动脉主干切口,缓慢向颈内动脉入颅方向推进,以颈总动脉分叉处为标记,推进20mm左右时感到阻力,即达到了较细的大脑前动脉内,阻断了大脑中动脉的所有血供来源,扎紧颈外动脉根部松扣。1h后,小心拔出尼龙线,扎紧动脉残端,缝合皮肤,完成中脑动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)导致局灶性脑缺血再灌注模型。伪手术组大鼠麻醉后,仅暴露颈内外动脉分叉,不闭塞大脑中动脉。
MCAO 6h后对大鼠的行为缺陷进行分级评分:0分:未观察到神经症状;1分:不能完全伸展左侧前爪;2分:将大鼠置于光滑平面上,推手术侧肩向对侧移动时,阻力降低;3分:大鼠自由行走时向左侧环转、转圈或倾倒;4分:软瘫,肢体无自发活动。积分越高,说明大鼠行为障碍越严重。
3.造模原理 用栓塞大脑中动脉法造成大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。
4.造模后的变化 MCAO术后,模型组大鼠表现出明显神经运动功能障碍,提鼠尾可见其左前肢内收紧贴胸壁,左侧肢体肌力下降,行走时偏向左侧。模型组脑组织中CK、LDH含量比伪手术组显著升高。脑组织Na+含量比伪手术组明显增高,脑组织明显水肿;K+、Ca2+含量呈升高趋势,但升高无显著性差异。