目的 建立白色念珠菌诱导的大鼠真菌性中耳炎模型,为药效评价提供动物模型支持。
方法 SD 大鼠 50 只,雌雄各半,随机分为正常对照组、空白注射组、潮湿组、免疫抑制组和潮湿+免疫抑制组,每组 10 只。 实 验开始 1 ~ 3 d,潮湿组每日对大鼠右侧耳部滴入 2 次 0氯化钠注射液,免疫抑制组每日经口灌胃给予 0mg / kg 醋酸地塞米松药液,潮湿+免疫抑制组每日对大鼠右侧耳部滴入两次 0氯化钠注射液的同时每日经口灌 胃给予 0醋酸地塞米松药液。 第 4 天,各组麻醉后,潮湿组、免疫抑制组和潮湿+免疫抑制组将 1×1010 CFU/ mL 白色念珠菌悬液经鼓膜穿刺注入到大鼠右侧中耳腔,每只 50 μL,空白注射组大鼠注入等体积空白培养 液,正常对照组不做任何处理;每日对潮湿组、潮湿+免疫抑制组大鼠右侧耳部滴入 2 次 0氯化钠注射液。 造模 期间,观察各组大鼠一般症状;造模第 5、10、15 天采集耳道分泌物进行白色念珠菌培养和革兰氏染色计数,造模第 15 天 ELISA 检测耳道灌洗液中白细胞介素⁃6(IL⁃6)、肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)和白细胞介素⁃1β(IL⁃1β),HE 染色 观察中耳组织病理学改变。
结果 与空白注射组相比,潮湿组、免疫抑制组和潮湿+免疫抑制组大鼠均出现不同程 度中耳炎症状,IL⁃6、TNF⁃α 和 IL⁃1β 水平显著升高(P < 0.05,P < 0.01),中耳出现不同程度的黏膜充血、水肿及炎 性细胞浸润现象,且免疫抑制组和潮湿+免疫抑制组大鼠耳道分泌物中白色念珠菌数量均显著增加(P < 0.05,P < 0.01)。
结论 本实验使用鼓膜穿刺方式注射白色念珠菌建立真菌性中耳炎大鼠模型成功,在潮湿+免疫抑制 条件效果更佳,可用来进行药效学作用的评价
阅读原文:大鼠真菌性中耳炎模型建立.pdf