目的 对于活体状态下持续进行舒张收缩的组织(如心脏),利用传统的组织固定方法,存在多种问 题,本研究从动物心脏取材流程到氯化钾终止浓度及程序的选择进行验证和评价,并与传统固定方式及主动灌流 固定方式对比分析,从而优化大小鼠等小型实验动物心脏组织的取材及固定方法。

方法 首先对心室内原位注射 KCl 溶液及摘取心脏后转置 KCl 溶液,这两种取材制备流程进行对比分析,随后从心脏在体形态还原度、舒张期终 止一致性、模型成功率、心肌显微形态及在特染中的应用,对传统固定方式、主动灌注固定方式及 KCl 终止法这三 种方式进行系统性比较。

结果 传统被动固定法,制备的心脏整体形态不规则,部分样本心室塌陷,心脏明显皱 缩,心室腔内及心肌血管内有明显血液存积,因停搏期不一致,个体间形态差异较大。 主动灌注法,心脏整体尺寸 显著增大,双室扩张严重,肌纤维发生断裂,显微结构受破坏。 而 KCl 终止法,心脏整体形态完整,心脏无明显皱 缩,停搏期较为一致,且制备样本组内个体间差异小。

结论 本文改进的 KCl 终止法于心脏在体形态还原度及后 续病理组织学染色分析方面皆优于传统被动固定法及主动灌注法。 该法为心脏病理组织学相关研究,提供组织固 定的方法学参考,同时,不同个体间心脏组织形态分析的一致性和在体还原度的提高,对动物模型心脏内部精细结 构,如左右心室、左右心房、室间隔、乳头肌、瓣膜等的观察分析,具有重要意义。

阅读原文：实验大小鼠心脏固定方法的优化.pdf