目的 探究跨膜蛋白 72( transmembrane protein 72,Tmem72)对小鼠神经干细胞体外增殖和分化的 影响。

方法 Western blot 检测野生小鼠中 Tmem72 在不同年龄、不同脑区中的蛋白表达情况;在 N2a 细胞中瞬时 转染 Tmem72 敲降质粒,利用 CCK8、RT-qPCR、Western blot 检测基因敲降后的增殖变化,流式细胞术检测细胞周期 及凋亡变化;在小鼠神经干细胞中用慢病毒感染细胞,RT-qPCR、Western blot 检测敲降效率,并检测增殖和分化标 记物的表达变化;转录组测序分析差异表达基因及基因富集的信号通路。

结果 Tmem72 在不同年龄段及脑区中 表达;与对照组相比,Tmem72 敲降组在 N2a 细胞与神经干细胞中 Tmem72 的表达均显著下调(P<0. 05);Tmem72 敲 降后 N2a 细胞的增殖能力及活力显著上调(P<0. 05),而凋亡能力显著下降(P<0. 01);Tmem72 敲降后神经干细胞 的增殖能力无显著变化,但促进向星形胶质细胞和未成熟神经元的方向分化(P<0. 05);转录组测序分析发现差异 基因富集到跨突触信号条件、胶质细胞分化调节,以及 PI3K-Akt、MAPK 信号通路、ECM-受体相互作用等方面。

结论 Tmem72 敲降后对 N2a 细胞起到促进增殖,抑制凋亡的作用;Tmem72 敲降促进神经干细胞向星形胶质细胞和 未成熟神经元的方向分化,提示 Tmem72 与神经发育密切相关。

阅读原文：Tmem72对小鼠神经干细胞体外增殖和分化的影响.pdf