目的 体外分离培养表皮干细胞(epidermal stem cells,ESCs),通过将 ESCs 移植皮肤损伤模型小鼠, 探讨 ESCs 对小鼠皮肤创面愈合的作用。
方法 取包皮环切术后的皮肤组织,采用黏附型Ⅳ型胶原分离培养 ESCs, 3T3 细胞作为饲养层分选 ESCs。 采用背侧创伤法建立小鼠皮肤损伤模型,随机分为空白对照组、模型组和点注射 细胞组。 治疗第 0、3、7、11、15 天拍照记录并计算创面愈合率。 治疗第 16 天,测定小鼠组织中 SOD、GSH、GSH-Px、 MDA 含量;ELISA 测定小鼠血清中 IL-10、TGF-β 和 TNF-α 含量;HE 染色观察创面皮肤组织病理学改变。
结果 治 疗第 7、11 天,点注射细胞组创面面积均低于模型组(P<0. 05),第 15 天点注射细胞组伤口几乎愈合( 98. 08% ± 1. 77%)。 与模型组相比,点注射细胞组小鼠组织中 SOD、GSH、GSH-Px 含量显著升高(P<0. 01),MDA 含量显著降 低(P<0. 01);ELISA 结果显示,与模型组相比,点注射细胞组小鼠血清中 IL-10 和 TGF-β 含量升高(P< 0. 05)、 TNF-α 含量降低(P<0. 05)。 HE 染色结果表明,与模型组相比,点注射细胞组炎症细胞浸润减少,有较多的毛囊和 胶原生成。
结论 ESCs 可以加速创面上皮化,有效促进伤口创面愈合。