目的 探讨人参皂苷Rg1在创伤性脑损伤 (traumatic brain injury,TBI) 小鼠模型血脑屏障、神经炎症、 行为学功能等方面的作用。
方法 实验分2部分。第一部分是将27只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为空白组、假 手术组、TBI模型组,每组9只;TBI模型组开颅后采用受控皮质冲击 (controlled cortical impact,CCI) 方式造 模,假手术组只开颅不进行打击,空白组不经任何处理;手术后进行造模效果评价。第二部分是将 40 只雄性 BALB/c小鼠随机分为假手术组、3个剂量的人参皂苷Rg1治疗组和溶剂DMSO对照组,每组8只小鼠。Rg1治疗组 在 TBI 建模成功后 6 h 腹腔注射剂量分别为 10、20、40 mg/kg 的人参皂苷 Rg1,而 DMSO 对照组给予等量的 1% DMSO,持续给药 1 周,每天 2 次。于造模后 1、3、7、14 d 分别进行改良的神经损伤严重程度评分 (modified neurological severity scores,mNSS);取造模后第3天的小鼠脑组织,采用蛋白质印迹法检测血脑屏障渗漏情况; 第14、16天分别采用高架十字迷宫实验、水迷宫实验检测小鼠神经行为功能;第28天麻醉、灌注后取脑,免疫荧 光染色观察小胶质细胞、星形胶质细胞活化等神经炎症。
结果 人参皂苷Rg1治疗组的血脑屏障标志物MMP-9表 达量减少 (P<0.01),小胶质细胞 (Iba-1 阳性表达) 和星形胶质细胞 (GFAP 阳性表达) 数量均明显减少 (P< 0.05),提示神经炎症得到抑制,且以20 mg/kg剂量效果最好 (P<0.01)。人参皂苷Rg1治疗组小鼠的mNSS评分 显著低于溶剂DMSO对照组 (P<0.01),进入开放臂次数比例显著高于DMSO对照组 (P<0.05);其在水迷宫实验 平台所在象限的时间比及穿越平台的次数均显著多于DMSO对照组 (P<0.05),且均以20 mg/kg剂量效果最佳。
结论 成功构建TBI小鼠模型并用于人参皂苷Rg1的损伤修复研究。人参皂苷Rg1能够显著改善TBI模型小鼠血脑屏 障,减轻神经炎症,发挥改善神经行为功能的作用,且以20 mg/kg剂量作用效果最为显著。