目的 探究生物正交点击化学修饰可否用于脂肪间充质干细胞(ADSC)的吲哚菁绿( ICG)标记及 活体示踪研究。
方法 收集小鼠脂肪组织进行 ADSC 的分离与培养,分别添加 Ac4ManNAz、DBCO⁃ICG 进行生物正 交点击化学反应,评估该方法对 ADSC 细胞活性的影响,并利用共聚焦显微镜观察 ADSC 的 ICG 标记情况;将标记 ICG 的 ADSC 移植到急性肝损伤小鼠体内,利用近红外二区荧光成像开展 ADSC 的活体示踪研究,收集肝组织进行 ADSC 归巢性分析;最后,评估生物正交点击化学修饰对 ADSC 移植治疗急性肝损伤疗效的影响。
结果 生物正交 点击化学可将 ICG 探针成功地修饰于 ADSC 细胞内,且不影响 ADSC 的细胞活性;标记 ICG 的 ADSC 移植到体内后 主要分布、定位在肝组织内,说明 ADSC 具有肝向归巢性;生物正交点击化学修饰不影响 ADSC 改善急性肝损伤小 鼠肝功能、减少肝细胞坏死的疗效。
结论 生物正交点击化学可用于 ADSC 的 ICG 探针标记及活体示踪研究。