方法一

1.造模材料  动物：Wistar大鼠，体重180～260g；药物：牛磺胆酸钠(sodium tau- rocholate, NaTc)，生理盐水，戊巴比妥。

2.造模方法  实验前用生理盐水配制成1.0％、2.0％、3.5％NaTc溶液备用。大鼠实验前禁食12h，允许饮水，3％戊巴比妥(40mg/kg)腹腔内注射麻醉。剖腹后经十二指肠用4号头皮针头插入胰管开口，向内逆行注入NaTc溶液(0.1ml/100g)。

3.造模原理  牛磺胆酸钠可破坏细胞壁的脂质双分子层，溶解细胞。

4.造模后的变化  1.0％和2.0％NaTc诱导急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)后12h，血清淀粉酶依次升高，组织水肿和炎症细胞渗出逐渐加重，病理学上属轻度和重度水肿型急性胰腺炎。3.5％NaTc诱导AP后，除血淀粉酶水平持续升高外，胰腺组织水肿、炎症细胞浸润进一步加重，并出典型胰腺细胞坏死和出血，病理学上已属坏死型胰腺炎。电镜显示细胞的超微结构也证实上述形态改变。随着NaTc诱导浓度的提高，胰腺损伤依次加重。

本模型适合评价药物对水肿型和(或)坏死型胰腺炎的最大防治效应，故具有一定的实用价值。

5.注意事项  手术器械严格消毒，防止手术感染，手术创伤应尽可能小，严格无菌操作。

方法二

1.造模材料  动物：健康的SD大鼠，雌雄不限，体重约在200～250g；药物：4％的戊巴比妥，4％去氧胆酸钠，血清淀粉酶试剂盒。

2.造模方法  分组：将大鼠随机分为两组：正常对照组和实验模型组。麻醉：用4％的戊巴比妥按1ml/kg体重的剂量经腹腔注射麻醉。分别固定大鼠于手术板上后剪毛，常规消毒，铺巾准备手术。分别行左颈总动脉插管取血液1ml，离心后取血清低温保存备检，取毕即回输等量的右旋糖酐。在无菌操作下打开腹腔，作上腹正中切口3cm左右，找到胃十二指肠交界处，再向下寻找到胰胆管十二指肠开口处。用动脉夹夹闭肝总管，将4.5号针头平面朝上于胰胆管十二指肠开口处行被膜下穿刺，并向胰管方向推进约2～3mm，按1ml/kg体重将去氧胆酸钠逆行推注至胰管中(0.2ml/min)，使整个胰胆管均匀隆起，退出针头，即用手压迫进针处约3～5min，然后去除动脉夹，关腹，并同时开始计时观察。

3.造模原理  去氧胆酸钠快速大量逆行注入胰腺管和胰腺组织中，可以通过直接的化学刺激引起胰腺组织的损伤，继而激活胰蛋白酶原，引起胰腺组织内有活性的胰蛋白酶大量产生，引起胰腺组织的自身消化，从而导致胰腺的破坏，急性坏死性胰腺炎就此发生和发展。

4.造模后一般变化  实验组大鼠在注射4％去氧胆酸钠后均出现呼吸急促、浅快，并随时间的延长而逐渐加重，以至于到后期皮肤黏膜发绀，大鼠呈现昏迷状态。

5.造模后生化及病理变化  解剖观察：在胰管逆行注射4％去氧胆酸钠后1h，大鼠的胰腺出现明显的局限性或弥漫性充血水肿，表面肿大变硬、包膜张力增高，甚至出血坏死，有少量腹水产生；6h后胰腺坏死程度加重，腹水量增加；此外，在大网膜及胆总管处发现浅黄色的皂化斑。大鼠的肺也随时间的延长出现充血、水肿、出血，并逐渐加重。胃肠明显水肿，出现麻痹性扩张。肝脏稍肿大，有出血点。双肾明显增大，颜色也由浅红变成暗红色。

显微镜下的检查结果：实验组大鼠各组织的病理改变明显可见，其坏死情况随时间的推移而逐渐加重，主要的典型变化为：胰腺腺泡、间质均有明显充血水肿和炎性细胞浸润，坏死程度随时间而逐渐加重，腺泡渐次出现充血肿胀，萎缩，出血，凝固性坏死，核碎裂，核溶解等。肺的主要表现为间质增宽、水肿、出血，肺泡塌陷融合，同时还出现代偿性肺气肿、肺瘀血等变化。肾的主要变化有肾小管损伤和水肿，肾小球囊内出血、水肿，肾间质渗出增加甚至出血性变；肝脏的主要变化有肝中央静脉瘀血，肝窦水肿，肝细胞间的距离增宽；小肠的主要变化是肠系膜充血水肿，肠黏膜绒毛变短，上皮细胞部分脱落甚至坏死，间质水肿，血管扩张，固有层有炎症细胞浸润。

血清淀粉酶测定结果：急性胰腺炎大鼠血清淀粉酶活性明显升高，与对照组比较，差异非常显著。

6.注意事项  手术过程中的严格无菌操作，减少因腹膜感染而对急性胰腺炎模型的影响；找到胰胆管在十二指肠处的开口并准确进针逆行注射，争取进针一次成功，这是本动物模型制作的重要环节；此外，造模后应该对大鼠进行严密的观察，防止其舌根后坠或分泌物堵塞气道引起的意外死亡。