目的 探讨环状 RNA 凌乱样激酶 1( circTLK1)在心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中的作用和潜在机 制。

方法 48 只 C57BL/ 6 小鼠分为假手术组(Sham 组)、MIRI 组、sh-NC 组、sh-circTLK1 组、sh-circTLK1+antagomirNC 组、sh-circTLK1+antagomir-miR-26a-5p 组,每组 8 只;采用结扎左冠状动脉前降支(LAD)建立 MIRI 小鼠模型。 超声心动图检测小鼠左心室射血分数(EF)、左心室缩短分数(FS)、左心室舒张末期内径(LVEDD)和收缩末期内 径(LVESD)以评估心脏功能,ELISA 检测血清乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白 I( cTnI)、肌酸激酶同工酶(CKMB)水平,苏木精-伊红(HE)染色检测心肌组织病理学变化,TUNEL 染色检测心肌细胞凋亡,实时荧光定量 PCR (qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测心肌组织中 circTLK1、miR-26a-5p、YES1 mRNA 和蛋白表达。 双荧光素 酶报告基因实验、RNA 结合蛋白免疫沉淀(RIP) 验证 circTLK1 / YES1 和 miR-26a-5p 之间的相互作用。

结果 与 Sham 组相比,MIRI 组小鼠 EF、FS、心肌组织 miR-26a-5p 水平显著降低,LVEDD、LVESD、血清 LDH、CK-MB 活性和 cTnI 水平、心肌细胞凋亡率、心肌组织 circTLK1、YES1 mRNA 和蛋白水平显著升高(均 P<0. 05),心肌细胞排列紊 乱,细胞间质有炎性细胞浸润;circTLK1 敲低可显著上调 miR-26a-5p,抑制 YES1 表达,改善上述指标变化(均 P< 0. 05),减轻心肌损伤;抑制 miR-26a-5p 可通过上调 YES1,显著减弱 circTLK1 敲低对 MIRI 的保护作用。 双荧光素 酶报告基因实验和 RIP 证实了 circTLK1 和 miR-26a-5p 之间的直接相互作用,YES1 是 miR-26a-5p 的靶标。

结论 敲低 circTLK1 可能通过调节 miR-26a-5p / YES1 轴在 MIRI 中发挥保护作用,circTLK1 可能是 MIRI 的潜在治疗靶点。

阅读原文：circTLK1通过miR-26a-5p╱YES1轴减轻小鼠心肌缺血╱再灌注损伤.pdf