猪全胰十二指肠移植模型

来源:《常用医药研究动物模型》 发布时间:2023年11月20日 浏览次数: 【字体: 收藏 打印文章

1.造模材料  动物:封闭群小型猪,体重15.5~43.0kg,猪龄2~3个月,供受体体重相近、雌雄不限,术前禁食24、6h禁水,随机分为供、受体两组。

2.造模方法  用氯胺酮、依托咪酯等进行全身麻醉,行气管插管,并于颈动脉、颈外静脉置管监测平均动脉压、中心静脉压等。腹部“大十字”切口开腹,分离出肠系膜上动、静脉,阻断胰十二指肠周围血管后,经肠系膜上静脉向门静脉内插管作为流出道,经腹主动脉插管用4℃改良HAES-sterial液进行灌注,灌注压力为7.84~9.81kPa。将带有门静脉、肠系膜上动静脉、腹主动脉段的胰十二指肠、脾脏整块切取,放入4℃冷保存液内。于4℃保存液中修剪门静脉残端,在灌注状态下检查、结扎胰腺周围渗漏小血管。于腹腔干及肠系膜上动脉开口两端切断腹主动脉,近端结扎。缝合关闭十二指肠球部断端,保留带有胆胰管的6~8cm肠段,肠腔用0.5%甲硝唑液冲洗干净后缝合关闭。受体移植前准备工作与供体手术同步进行(两组人员)。取左腹股沟上方2cm处与腹股沟平行的切口,长约15cm,依次切开,于腹膜外分离出髂总动静脉,进行全身肝素化。将移植物的门静脉、腹主动脉远断端分别与受体髂总静脉、髂总动脉行端侧吻合,恢复胰腺十二指肠血供后切除脾脏。剪开腹膜约3cm,拖出部分空肠壁,与供体十二指肠进行侧侧吻合(吻合置于腹膜外),逐层关腹。

术后每天输液1500~2000ml,低分子右旋醣酐500ml,常规用抗生素,并给予肝素1mg/kg,3天后逐渐恢复饮食。术后1~7d每天经彩色多普勒超声检查移植胰腺形态及血流状况。术后1、3、5、7天行超声检查时在B超引导下用18G自动活检枪行移植胰尾部穿刺活检,行常规病理检查。

3.造模后一般变化  供体手术时间(124.0±13.8)min,供胰热缺血时间0min,平均冷缺血时间为(145.0±18.6)min,平均灌注液量为(1500±200)ml。受体平均手术时间(130.0±21.8)min,平均失血量(236±80)ml。20例胰腺移植手术中,2例死于持续性低血压。2例术后3天出现移植胰腺化脓、坏死,再次手术探查发现1例为出血坏死性胰腺炎,1例发生吻合血栓形成,移植胰缺血坏死。术后18例受体存活时间超过3天,其中16例受体移植胰腺功能存活时间平均达(16.5±3.8)天。

彩超检查结果:术后1~3天,16例移植胰腺形态正常、血流信号丰富,动脉吻合口平均血流速度约(48.0±3.5)cm/s,血管阻力指数(RI)为0.66±0.25。4天后移植胰开始出现不同程度肿大、间质水肿及胰周积液,并伴随出现移植胰血流减少,动脉吻合口血流速度增快,最快达85cm/s,RI增加至0.80以上。

4.造模后病理变化  术后1~3天,移植胰主要表现为腺泡轻度水肿、间质内散在淋巴细胞浸润,偶见点状坏死灶,胰岛正常。3天后,可见腺泡呈散在的空泡变性、片状坏死,胰腺间质及导管周围可见大量淋巴细胞浸润,有时可见大片的坏死出血灶,胰岛结构不同程度破坏。

5.注意事项  手术器械严格消毒,防止手术感染,手术创伤应尽可能小,严格无菌操作。


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