目的 探讨大蒜素改善高糖诱导的人腹膜间皮细胞-间充质转化的相关机制。

方法 培养人腹膜 间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)后将其进行两次分组,分组 1:①对照组;②8. 5 mmol / L D-葡 萄糖诱导组(8. 5 mmol / L DG 组);③17 mmol / L D-葡萄糖诱导组(17 mmol / L DG 组);④34 mmol / L D-葡萄糖诱导 组(34 mmol / L DG 组);⑤68 mmol / L D-葡萄糖诱导组(68 mmol / L DG 组)。 其中除对照组外,其余组分别用 8. 5、 17、34、68 mmol / L 的 D-葡萄糖诱导 48 h。 分组 2:①对照组;②34 mmol / L D-葡萄糖诱导组(HG 组);③34 mmol / L D-葡萄糖+低剂量大蒜素诱导组(AL-L 组);④34 mmol / L D-葡萄糖+中剂量大蒜素诱导组(AL-M 组);⑤34 mmol / L -葡萄糖+高剂量大蒜素诱导组(AL-H 组);⑥34 mmol / L D-葡萄糖+JAK2 抑制剂诱导组(JAK2 组)。 其中 HG 组 用 34 mmol / L 的 D-葡萄糖诱导 48 h,AL-L 组、AL-M 组、AL-H 组用 34 mmol / L 的 D-葡萄糖预处理 6 h 后分别用 10、20 和 40 ng / mL 大蒜素诱导 48 h,JAK2 组加入 1 μmol / L AG490 预处理 6 h 后用 34 mmol / L 的 D-葡萄糖诱导 48 h。 ELISA 检测 HPMCs 上清的 IL-6、TNF-α 和 IL-1β 的含量;CCK-8 检测细胞增殖并观察形态;Western blot 检测 JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、N-cadherin、E-cadherin、Vimentin、α-SMA、MCP-1、p65、p-p65 蛋白的表达情况。

结果 与对照组相比,高糖诱导组 HPMCs 的相对存活率明显降低(P<0. 01),细胞形态表现异常,促进上皮细胞-间充质 转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)发生的 α-SMA、N-cadherin 和 Vimentin 表达明显上调,抑制 EMT 发生 的 E-cadherin 蛋白表达明显下调,JAK2/ STAT3 信号通路被激活从而导致 EMT 的发生(P<0. 01);而大蒜素能明显促 进高糖诱导后的 HPMCs 增殖,恢复异常的细胞形态,调节与 EMT 发生的相关蛋白水平从而改善 HPMCs 的上皮间质 转分化;与高糖诱导组相比,大蒜素处理组 HPMCs 的促炎症因子 IL-1β、IL-6 和 TNF-α 明显降低,促炎症蛋白 p-p50 和 MCP1 表达明显下调,表明大蒜素能改善 EMT 引起的炎症。

结论 大蒜素可通过抑制 JAK2/ STAT3 信号通路调节 EMT 发生的标志蛋白、炎症信号蛋白及炎症因子水平从而改善高糖诱导的 EMT 及炎症。

阅读原文：大蒜素通过JAK2╱STAT3信号通路改善高糖诱导的人腹膜间皮细胞-间充质转化.pdf