基因编辑金标准：TurboKnockout技术快速构建复杂小鼠模型
在现代生命科学研究中，基因编辑技术的选择对实验结果的可靠性和效率至关重要。现在常用的CRISPR/Cas核酸酶技术获得基因编辑小鼠，从打靶载体构建——受精卵显微注射——获得F0小鼠——获得F1杂合子小鼠——获得F2纯合子小鼠，周期往往需要9-12个月，其中从F0到F2纯合子小鼠的周期约6个月。在科学研究领域，时间往往意味着竞争力，高效的实验技术和流程是科研成功的关键因素。
F0代纯合子小鼠的安全风险 相较于传统的ES打靶技术，CRISPR/Cas核酸酶介导的基因编辑小鼠无需经历ES细胞电转和筛选，直接将打靶载体注射到受精卵可获得阳性Founder鼠（F0）。但F0代小鼠具有较高的嵌合比例，因为核酸酶技术在受精卵阶段进行基因编辑，常常发生在受精卵的1细胞、2细胞甚至4细胞期，基因编辑也存在随机性。这导致不同F0代小鼠之间的基因型不一致，且同一只F0代小鼠也可能有多种基因型嵌合。 虽然调整注射浓度可能会得到少量所谓的纯合子F0代小鼠，但直接用于实验的话稳定性较差，难以提供一致的实验结果，且可提供的小鼠数量有限，因此仍然需要至少2代繁育。 新一代ES基因编辑技术TurboKnockout® 赛业生物在传统ES打靶技术的基础上，研发出了升级版的TurboKnockout®基因编辑技术，利用优化的纯合ES克隆打靶体系，可筛选基因敲除、敲入、点突变的纯合ES细胞，该技术结合了囊胚前注射和四倍体补偿技术进行显微注射，周期快至3个月，可大批量获得基因一致的纯合子小鼠。
TurboKnockout®技术优势 1.编辑类型多样化：可进行基因敲除、敲入、点突变或人源化等多种项目类型的基因修饰； 2.QC体系多样化：细胞阶段除了可进行除常规PCR鉴定外，还可以通过多种手段质检（QC）ES克隆打靶的准确性，包括染色体核型鉴定、Southern Blot鉴定、qPCR鉴定、FACS鉴定等表达检测； 3.F0基因型稳定：结合赛业生物专利：TurboKnock显微注射技术和四倍体补偿技术，保障交付的所有F0代小鼠的基因型一致，基因修饰准确、效果稳定； 4.品系选择灵活：赛业生物可提供C57BL/6NCya、C57BL/6JCya、BALB/cAnCya、129S2/SvPasCya等多品系选择。
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