一、实验目的

1. 练习分离果蝇幼虫唾腺的技术，学习唾腺染色体的制片方法

2. 观察了解果蝇唾腺染色体的形态学及遗传学特征

二、实验原理

1.果蝇是双翅目昆虫，幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的唾液腺染色体；

2.唾液腺染色体不断地进行自我复制而不分开，经过许多次的复制形成约1000～4000拷贝的染色体丝，合起来达5mm宽，400mm长，比普通中期相染色体大得多（约100～150倍），所以又称为多线染色体；

3.唾液腺染色体具有许多重要特征，为遗传学研究的许多方面，如染色体结构、化学组成、基因差别表达等提供了独特的研究材料。

三、实验材料与器具

• 三龄幼虫

• 0.9%生理盐水

• 胭脂红染色液

• 解剖镜 解剖针 吸水纸

四、实验步骤

(1)剥离唾腺

在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。

每只手各持一个解剖针，在解剖镜下进行操作。果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，左手持解剖针按压住虫体后端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。

唾腺是一对透明的棒状腺体，外有白色的脂肪组织（不透明）。去除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。

果蝇唾腺剥离示意图

(2)染色： 吸去生理盐水，注意操作时要边观察边吸湿，最好用解剖针轻压，防止连同唾腺一起吸走；滴加胭脂红染色液，染色20-30min

(3)压片： 染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层滤纸。将片子放在实验台上，用大拇指均匀用力压片。（注意不要使盖片移动。）

五、注意事项

1. 一定加生理盐水，否则唾腺易干。

2. 将脂肪组织清除干净

3. 水不可太多，否则幼虫会漂浮而且活跃

4. 染色时间不可过长，否则背景也着色

5. 压片时要揉，用力要均匀

6. 染色完以后，将旧的染色液吸去，加新的染色液，再压片

7. 吸水时勿将唾腺一起吸走

六、实验结果观察

1．检查你制作的制片，寻找形态良好、分散适中的图象仔细观察各条臂的特点。

2．画出所制染色体的形态，大小，并标出明显的横纹特点。