2. 计数法
用血细胞计数法可以准确的测定每毫升精液中所含的精子数量。其操作方法是,对精子密度高的精液用红细胞吸管作稀释计算,对精子密度低的精液用白细胞吸管作稀释计算。将计算室置于显微镜 400~600 倍下计数。计算室上有 25 个大方格,每个大方格有16 个小方格,共400个小方格。计算精子数只需数出四个角和中间处的一个大方格,即共计 5 个大方格的精子数即可,然后推算出1ml内的精子数。简化的计算方法是数出 5 个大方格的精子数×5万×稀释倍数,即为所测得的精子数。
其操作步骤如下图所示。
3.光电比色法
光电比色法是目前准确、快捷评定精子密度的一种方法。其原理是根据精子数越多、精子浓度越高,其透光性越低的特性,利用光电比色计通过反射光和透光度来估测精子密度。首先将原精液稀释成不同的倍数,并用血细胞计数法计算其精子密度,从而制成已知系列各级精子 密度的标准管,然后使用光电比色计测定其透光度,根据透光度求出每相差 1% 透光度级差的精子数,编制成精子密度差数表备用。一般检测样本时,只需将原精液按1:80~100 的比例稀释后,先用光电比色计测定其透光值,然后根据透光度查对精子密度差数表,即可从中找出其相对应的精子密度值。目前可将被测样本的透光度输入电脑,即可显示其精子密度。 根据射精量和精子密度即可计算出动物每次射精的总精子数。如:小鼠每次射精的总精子数约0.2~0.25亿(李聚学等人),兔为3~7亿,猪为 300~600 亿,比格犬为 9~11 亿。