方法
2.1 封闭群选育
2.1.1 组建核心群和生产群核心群根据引种群种猪的来源和血统严格挑选, 由l4头公猪和30头母
猪组成。主要用于保种选育和为生产群提供种猪。生产群由引进的其它种猪以及核心群生产的种
猪组成。生产普通级实验动物,用于生产性能测定、兽医生物制品检定和生物医药实验等。
2.1.2 实行闭锁繁育猪群严格闭锁,不再引进任何外来种猪,后备猪均来自封闭群后代。为控制每代近交系数上升速度,采用避免全同胞交配的不完全随机交配。
2.1.3 选种方法尽量保持每个世代的个体处于相同的饲养管理条件下,然后根据自身成绩结合同胞资料进行严格选种,尽量保留血统或家系,不轻易淘汰家系。主要依据体重和窝产仔数选留种猪,体重向下分阶段选择,实行各家系等数留种。在每个世代中,每个父系家系留1头公猪,每个母系家系留下1头母猪,通过选优法进行选种。
2.1.4 世代间隔 一般在初产母猪的头胎仔猪中选留种猪组成下一世代。
2.2 近交系选育
2.2.1 组建家系通过毛色、系谱记录和种猪档案资料,分析种猪血缘、生产繁殖性能情况,在引
种群挑选种猪组建近交黑系群和白系群。
2.2.2 近亲繁育采用全同胞辅以亲子交配进行近亲繁育以加快基因纯合速度:留存的每个家系,都
可以扩繁成一个近交系。
2.2.3 选种方法采用家系内个体选择的方法,主要根据体重分阶段向下选择,以2月龄和配种前选
择为主。
2.2.4 世代间隔尽量缩短世代间隔,一般在初产母猪的头胎仔猪中选留种猪,后备猪6月龄左右参
力口酉己种。
2.3 生物学特性研究
从生长发育、繁殖学、血液生理生化、解剖、分子生物学等方面对生物学特性进行研究,
深入、全面地分析五指山小型猪潜在的遗传品质,进一步明确其生物学特性,以促进五指山小型猪的
保种选育和实验动物化进程。
2.4 实验动物化基础研究
采用常规检验方法进行微生物、寄生虫检测,掌握种群的病原生物感染状况,以利于开展
质量监测和生物净化工作。同时,逐步将封闭群五指山小型猪用于疫苗安全评价中,为五指山小型
猪作为疫苗检验用标准化实验动物积累基础资料。
2.5 遗传检测
利用多重荧光PCR.基因组扫描技术对封闭群和近交选育群五指山小型猪26个微卫星基因座进行
遗传检测,对封闭群的基因异质性和近交选育群的基因纯合度进行分析,以期为进一步选育提供科学依据。
2.6 实验猪标准化研究应用
鉴于我国目前尚未制定出台实验猪生物学特性数据测定技术规程,依据“实验动物资源共性描
述规范”的基本内容和总体要求,本着科学性、实用性的原则,结合实验猪特点,制订“实验用
五指山小型猪生物学特性数据测定技术规程”, 以规范各类数据的测定过程和技术要求。
根据实验用猪的特点,从提高产品质量和保障动物福利角度出发,借鉴先进的研究成果和经验,
提出相应的饲养管理技术操作规程, 以形成实验用五指山小型猪各阶段的规范化配套饲养技术。
3 结果
3.1 封闭群选育结果
经系统整理、选育和培育,建立了实验用五指山小型猪封闭群,并繁育二代。核心群共有公
猪14头,母猪30头;生产群共有公猪9头,母猪60头。测定结果表明,头胎窝产仔数6.35±1.53
头、多胎窝产仔数7.47±1.96头,实验猪初生重0.57±0.1 1 kg,6月龄体重、体高、体长、胸围分
别为12.11±2.99 kg、32.64±3.81 cm、52.13±5.43 cm和50.64±5.77 cm,保持了体型矮小的特性,繁殖性能与实验猪标准化程度提高,可满足多种研究领域的需求,经省级实验动物质量监督检
测机构检测,各项指标符合普通级实验动物猪标准【SCXK(粤)2008.0022]。
3.2 近交系选育结果
建立了两个近交选育群,黑系群共有种猪25头,白系群共有种猪18头。近交选育群在引进基
础上又分别近交了二代和三代,平均基因纯合率为56.57%,基因纯合度得到进一步提高,体型外貌
一致,性能趋于稳定。其中,黑系群体型较小,近交代数高,基因位点纯合性高;白系群体型稍
大,全身皮肤白色,性情温顺。
3.3 生物学特性研究
系统测定了实验用五指山小型猪的繁殖性能、生长发育、血液生理生化指标[⋯1、脏器系数【12l、
下颌骨参数【l3,l4】等生物学基础数据,获取基本信息、生理、生化、遗传、解剖等数据7万多个。
研究证明五指山小型猪是理想的实验动物资源,具有广泛的适应性,适合在我国不同气候环境、饲
养条件下饲养繁育。
3.4 实验动物化基础研究
采集血清和皮肤样本,用血清学和显微镜观察方法进行6项微生物和体表寄生虫学指标的检
测。结果表明:封闭群五指山小型猪疫苗免疫良好,无烈性病原生物感染,主要传染病原的抗体
阴性,满足普通级小型猪的指标要求,具有选育、净化升级和应用的良好基础。选用1—2月龄猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阴性的普通级实验用五指山小型猪与大型瘦肉型商品杂交猪对比,进行繁殖与呼吸综合征病毒疫苗安全性评价试验。结果表明,五指山小型猪抗体产生时问早于大型猪,抗体产生的一致性好,显示五指山小型猪在安全性评价试验中敏感性较高。
3.5 遗传质量检测
选用26个微卫星基因座对封闭群和近交选育群遗传检测结果显示,在五指山小型猪全群中,平均检测到9.93个等位基因;在封闭群中,平均检测到8.37个等位基因;在近交选育群中平均检测到6.92个等位基因。五指山小型猪全群平均多态信息含量为0.6949,平均杂合度为0.5391:封闭群平均多态信息含量为0.7069,平均杂合度为0.5478;近交选育群平均基因纯合率为56.57%,平均多态信息含量为0.6042,平均杂合度为0.4478。表明五指山小型猪封闭群具有丰富的遗传多样性,保持了引种群的遗传异质性;近交选育群经选育具有较高的遗传纯度和稳定性。
3.6 标准化研究应用
生产采用封闭式猪舍、高床饲养、自动饮水、水帘降温、红外取暖、分阶段饲养等先进工艺和严格的环境与质量控制技术,提出具有实用性、科学性和先进性的实验用五指山小型猪生物学特性数据测定技术规程与饲养管理技术操作规程,并在生产与研究中应用,促进了实验用五指山小型猪生产繁育和研究的规范化与标准化。
3.7 推广应用
先后向不同单位提供实验用猪,用于组织培养、猪用疫苗检验、药理药效学实验、皮肤、外科、心脏、血管、放射治疗和牙科实验等, 用户普遍反映该猪参考指标稳定,特点明显。
来源:广东省实验动物监测所
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