( 二 ) 兔的输精

1. 精液注入器的制作

雌兔的阴道前庭长约5cm,阴道长约 7cm,而且其移行部是弯曲的,因此必需制作与之相适合的精液注入器。一般用外径 6mm,长 15cm 的玻璃管或塑料管,在距前端约 5cm 处弯l200,末端装上胶头,制成吸管。

2. 假孕的诱导

在精液注入前5h至精液注入后2h之间,用结扎输精管的雄兔与雌兔交配,或对雌兔静脉注射100IU HCG或 2.5mg LH,以诱导假孕。

3. 精液的稀释及精子检查

采取的精液,进入集精管后,就与集精管一起保存于37℃的热水里。用一部分精液来检查精子数及精子的活力。根据检查结果,对精液用0.85% 的生理盐水、不含钙的磷酸缓冲液(PBS)或体外受精用培养基进行适当的稀释。稀释倍数,以注入时精子数达(2O～50)×106/(O.3～0.7mI)为标准。

4. 精液的注入

(l) 保定:注入精液时,首先要将雌兔保定,2人操作时,辅助者坐在椅子上,抓住兔的颈部和后肢,将其倒立,用两腿夹住其胴体。1人操作时,将其颈部向下,倒立,用两膝将其颈部牢牢固定,一手抓住其尾部,将其吊起来。

(2) 保定后,扒开其外阴部,将吸有 0.3～0.7ml 稀释精液的注入器轻轻地插入,缓慢地向内部推进,插入约 5cm 时就会碰到阴道壁,这时将注入器向里面插入,一直插入到阴道的深部约( 12～14cm);

(3) 挤压胶头,慢慢注入精液。